[發(fā)明專利]一種小分子肝肽的提取方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202210852133.6 | 申請日： | 2022-07-19 |
| 公開（公告）號： | CN115181775A | 公開（公告）日： | 2022-10-14 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張建明 | 申請（專利權(quán)）人： | 張建明 |
| 主分類號： | C12P21/06 | 分類號： | C12P21/06;C07K1/14;C07K1/34 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 210000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 分子 提取 方法 | ||
1.一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，所述小分子肝肽的提取方法包括初步酶解、二次酶解、三次酶解、滅酶、分離純化、濃縮凍干。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，所述初步酶解時使用消化酶和肽聚糖降解酶；所述二次酶解時使用消化酶和肽聚糖降解酶；所述三次酶解時使用細胞色素氧化酶和腎上腺素，并加入二甲基亞砜和2-吡啶硫基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，所述小分子肝肽的提取方法，包括以下具體步驟：
(1)將新鮮動物肝臟用打漿機打碎，并加入新鮮動物肝臟質(zhì)量5～8倍的純化水，攪拌均勻后，升溫至50～55℃，加入消化酶和肽聚糖降解酶，在30～50rpm下攪拌酶解20～40min，制得初次酶解液；
(2)向初次酶解液中加入蛋白酶、糖原磷酸化酶和小麥羧肽酶，攪拌均勻后降溫至15～30℃，在30～50rpm下攪拌酶解30～50min，制得二次酶解液；
(3)向二次酶解液中加入細胞色素氧化酶和腎上腺素，攪拌均勻后，升溫至50～60℃，在30～50rpm下攪拌酶解10～20min，再加入二甲基亞砜和2-吡啶硫基，反應(yīng)2～4h，制得三次酶解液；
(4)將三次酶解液滅酶，然后進行離心，得上清液，將上清液經(jīng)過納濾膜納濾，最后進行冷凍干燥，制得小分子肝肽。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(1)中：新鮮動物肝臟為豬、牛、羊或鯊魚的肝臟中的一種或幾種混合。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(1)中：新鮮動物肝臟、消化酶和肽聚糖降解酶質(zhì)量比為100:0.6:1～100:1.5:1.5。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(2)中：初次酶解液、蛋白酶、糖原磷酸化酶和小麥羧肽酶的質(zhì)量比為100:1:0.5:0.8～100:3:1.2:1.5。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(3)中：二次酶解液、細胞色素氧化酶、腎上腺素、二甲基亞砜和2-吡啶硫基的質(zhì)量比為100:2:1:30:0.3～100:2.5:2:50:0.5。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(4)中：滅酶時，升溫至90～95℃，保溫10～20min。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(4)中：納濾膜納濾的孔徑為1～2nm。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種小分子肝肽的提取方法，其特征在于，上述步驟(4)中：冷凍干燥時，真空度為0.1～0.3mbar，溫度為-40～-50℃，時間為16～20h。
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