[發明專利]一種用于超微量核酸全自動提取的納米硅羧基磁珠的制備方法及應用在審
| 申請號： | 202210797140.0 | 申請日： | 2022-07-08 |
| 公開（公告）號： | CN115069222A | 公開（公告）日： | 2022-09-20 |
| 發明（設計）人： | 周勇;郭嘉 | 申請（專利權）人： | 杭州聯碩生物醫藥科技有限責任公司 |
| 主分類號： | B01J20/22 | 分類號： | B01J20/22;B01J20/28;B01J20/30;C12N15/10 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 310018 浙江省杭州市錢塘*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 用于 微量 核酸 全自動 提取 納米 羧基 制備 方法 應用 | ||
1.一種用于超微量核酸全自動提取的納米硅羧基磁珠的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一，超順磁性甘油修飾的Fe3O4納米顆粒的制備：配置0.5mol/L的可溶性三價鐵離子鹽加入到乙二醇溶液中，攪拌均勻后加入CH3COONa·3H2O至體系PH為中性，然后將該混合溶液倒入密閉容器中，在150～300℃條件下反應6～12h，冷卻至室溫后，磁分離出黑色沉淀，用去離子水反復洗滌沉淀物數次，-10℃冷凍干燥12h，得到超順磁性甘油修飾的Fe3O4納米顆粒；加入無水乙醇，得到納米磁珠無水乙醇混合液；超聲振蕩納米磁珠無水乙醇混合液25～35分鐘后，加入硅烷化試劑，室溫下攪拌6～8小時，磁分離，即得到硅基包被磁珠;
步驟二，制備Fe3O4-SiO2-COOH納米硅羧基磁珠：取上述步驟一中獲得的的硅基包被磁珠2g及羥基丁二酸2g 于100 ml 的水溶液中90℃充分攪拌反應2小時，用雙蒸水洗至PH中性,并真空干燥，獲得Fe3O4/SiO2-COOH納米硅羧基磁珠。
2.根據權利要求1所述用于全自動核酸提取的納米硅羧基磁珠的制備方法，其特征在于，所述步驟一中加入的硅烷化試劑為APTES,SELECTRA-SIL試劑。
3.根據權利要求1所述用于全自動核酸提取的納米硅羧基磁珠的制備方法制得的磁珠，其特征在于Fe3O4-SiO2-COOH納米硅羧基磁珠的飽和磁化強度可達77.6 emu/g。
4.根據權利要求1所述用于全自動核酸提取的納米硅羧基磁珠的制備方法，其特征在于，獲得的Fe3O4/SiO2-COOH納米硅羧基磁珠為核殼結構，包括Fe3O4納米顆粒內核，SiO2殼層，SiO2外殼層包覆在多個Fe3O4納米顆粒外表面，Fe3O4納米顆粒外表面附帶羥基，共三層結構。
5.根據權利要求1-4任一所述的納米硅羧基磁珠的應用，其特征在于，可以適配全自動核酸提取儀，用于全自動提取多種樣本來源的超微量核酸，可應用于全血、血清、唾液、新鮮動物組織等生物檢材中的核酸提取及純化。
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