[發明專利]基于NKA-9型大孔樹脂對驅蟲斑鳩菊總黃酮粗提物的純化生產方法

在審

• 申請號: 202210746359.8
• 申請日: 2022-06-15
• 公開（公告）號: CN115998786A
• 公開（公告）日: 2023-04-25
• 發明（設計）人: 秦冬梅;鄭萌玥;陳衛軍;鄒楠
• 申請（專利權）人: 石河子大學
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P39/06;A61K131/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于NKA-9型大孔樹脂對驅蟲斑鳩菊總黃酮粗提物的純化生產方法，

本發明其特征在于：包括如下步驟：

步驟一：利用加熱回流法對驅蟲斑鳩菊藥材進行總黃酮的提取；

步驟二：驅蟲斑鳩菊總黃酮的純化；

(1)對大孔吸附樹脂進行預處理；

(2)大孔樹脂的篩選：將步驟一中得到的驅蟲斑鳩菊總黃酮粗提液加入等量預處理好的大孔吸附樹脂中，取等量乙醇溶液解吸，于室溫充分吸附、解吸12-24h，測定溶液吸光度?？傸S酮含量采用NaNO₂溶液-Al(NO₃)₃溶液-NaOH溶液顯色法測定；

(3)對篩選的大孔吸附樹脂進行吸附動力學模型、吸附等溫線模型回歸方程擬合；

(4)均勻設計與統計分析：a.依次調節上樣液濃度為0.5～8.5mg/mL；上樣液pH為1～8；乙醇洗脫液濃度為10％～90％；洗脫流速為0.5～3mL/min進行單因素考察，并繪制篩選樹脂的動態泄露曲線與洗脫曲線，用(2)中方法測定所得驅蟲斑鳩菊提取液中總黃酮含量；b.根據a.中考察結果篩選出上樣液濃度、上樣液pH、洗脫液濃度三因素，以總黃酮回收率為優化指標，使用均勻設計表U₁₀(10³)進行驅蟲斑鳩菊總黃酮純化生產方法優化；

步驟三：純化后驅蟲斑鳩菊總黃酮體外抗氧化作用；

(1)清除1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基活性能力：稱量驅蟲斑鳩菊總黃酮提取物、純化物和L-抗壞血酸(Vc)使其濃度呈梯度。取適量DPPH試劑，加入10～20倍量的乙醇溶液，混勻后避光保存。按比例1∶4取待測液和DPPH溶液混合，室溫避光反應25～30min，測定其在517nm波長處的吸光度值，計算自由基清除率；

(2)清除2，2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)自由基活性能力：將ABTS溶液與過硫酸鉀溶液按比例混勻，于暗處反應14～16h得到ABTS工作液。按比例1∶9取(1)配制的梯度溶液與稀釋40～50倍的ABTS工作液混合，室溫避光反應8～12min，測定其在734nm波長處的吸光度值，計算自由基清除率。

2.根據權利要求1所述的一種基于NKA-9型大孔樹脂對驅蟲斑鳩菊總黃酮粗提物的純化生產方法，其特征在于：所述的步驟二中的大孔吸附樹脂為D101型、AB-8型、NKA型、NKA-9型、X-5型、DM130型、DM301型、LS-300型、LS-300B型號大孔樹脂中的至少一種。

3.根據權利要求2所述的一種基于NKA-9型大孔樹脂對驅蟲斑鳩菊總黃酮粗提物的純化生產方法，其特征在于：所述的大孔吸附樹脂為NKA-9型號的大孔吸附樹脂。