[發明專利]一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針及其制備方法

在審

• 申請號: 202210732694.2
• 申請日: 2022-06-24
• 公開（公告）號: CN115073435A
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 李劍利;閆媛媛;厙夢堯;劉萍
• 申請（專利權）人: 西北大學
• 主分類號: C07D405/12
• 分類號: C07D405/12;C09K11/06;G01N21/64
• 代理公司: 西安弘理專利事務所 61214
• 代理人: 劉娜

本發明公開了一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針及其制備方法，具體為：將6?羥基?1?四氫萘酮與濃硫酸混合并冷，加入4?(二乙胺基)水楊醛，進行加熱攪拌，柱層析分離純化，得到熒光團FR?OH；將2?巰基吡啶溶于氯仿中，再加入2?巰基水楊酸和氯化亞砜，回流攪拌，抽濾，得到2?(2?吡啶基二硫代)苯甲酸PBA；將無水二氯甲烷溶液、熒光團FR?OH、PBA、EDU和DMAP進行混合攪拌，柱層析分離即可。本發明的探針分子水溶性好，在580nm波長激發下對硫化氫有特異性響應，且選擇性和抗干擾性優異，實現了細胞內源性硫化氫的可視化檢測。

技術領域

本發明屬于分析檢測技術領域，具體涉及一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針，還涉及該近紅外熒光探針的制備方法。

背景技術

硫化氫一直被認為是一種有臭雞蛋味的有毒氣體，但隨著科學技術的發展，硫化氫被看作第三種氣體信號分子，它在人體內的濃度異常與多種疾病相關。內源性硫化氫在生命體中主要是通過內源性酶催化途徑產生，即以L-半胱氨酸為底物，分別在三種酶胱硫醚-β-合成酶CBS，胱硫醚-γ-裂解酶CSE以及3-巰基并酮酸巰基轉移酶3-MST催化下產生硫化氫。這三種酶在人體的大腦、心臟、肺、肝、腎、血管胰腺、腸道中均有分布。而硫化氫的濃度異常會引發相關疾病，比如：糖尿病、心臟病、高血壓、肝硬化等。

近年來科學研究者們也構筑了許多檢測硫化氫的熒光探針。但由于探針的專一性差，尤其是復雜生物環境中硫醇的存在導致探針對硫化氫的識別響應具有干擾性。因此，設計一例能特異性識別硫化氫、且具有水溶性好的特性、還可以對內源性硫化氫進行細胞成像的近紅外熒光探針具有重要的意義。

發明內容

本發明的目的在于提供一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針，該熒光探針分子對硫化氫的檢測具有良好的選擇性和抗干擾能力。

本發明另一的目的在于提供上述檢測硫化氫的近紅外熒光探針的制備方法。

本發明所采用的技術方案是，一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針，該熒光探針具有如下式(Ⅰ)所示的結構式：

本發明所采用的另一技術方案是，一種檢測硫化氫的近紅外熒光探針的制備方法，具體按以下步驟實施：

步驟1，將6-羥基-1-四氫萘酮與濃硫酸混合并冷卻到0℃，之后加入4-(二乙胺基)水楊醛，攪拌均勻，在氮氣保護條件下，進行加熱攪拌反應，待冷卻后倒入-5℃～0℃的冰水浴中，使反應物完全融化，柱層析分離純化，得到熒光團FR-OH；

步驟2，將2-巰基吡啶溶于氯仿中，再加入2-巰基水楊酸和氯化亞砜，室溫條件下回流攪拌1.0h，再用布氏漏斗進行抽濾，得到淡黃色固體即為產物2-(2-吡啶基二硫代)苯甲酸PBA；

步驟3，將無水二氯甲烷溶液、熒光團FR-OH、PBA、EDU和DMAP進行混合，室溫攪拌，柱層析分離得到產物即為檢測硫化氫的近紅外熒光探針FR-H₂S。

步驟1中，6-羥基-1-四氫萘酮、濃硫酸與4-(二乙胺基)水楊醛的質量比為1:9.38:1；反應溫度為90℃，反應時間為6h。

步驟2中，2-巰基吡啶、氯仿、2-巰基水楊酸和氯化亞砜的質量比為2:67:1:1。

步驟3中，無水二氯甲烷溶液、熒光團FR-OH、PBA、EDU和DMAP的質量比為3900:10:10:10:1。

本發明的有益效果是，本發明設計的探針分子水溶性好，在580nm波長激發下對硫化氫有特異性響應，且選擇性和抗干擾性優異，實現了細胞內源性硫化氫的可視化檢測。

附圖說明

圖1是本發明方法制備近紅外熒光探針的原理圖；