[發(fā)明專利]一種大豆低聚肽質(zhì)量控制方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210578080.3
• 申請日: 2022-05-25
• 公開（公告）號: CN115047100B
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李曉敏;郁曉藝;徐巨才;陳雅君;郭丹;陳晶;伍鎣;毛新亮
• 申請（專利權(quán)）人: 完美（廣東）日用品有限公司;完美(中國)有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/72
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 薛夢

1.一種大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）配制多肽VV和多肽VN標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

（2）配制大豆低聚肽樣品溶液；

（3）用液相色譜對標(biāo)準(zhǔn)品溶液、大豆低聚肽樣品溶液進行組分分離，得到鹽性組分和非鹽性組分；

（4）對液相色譜分離的非鹽性組分進行質(zhì)譜定性和定量分析；

所述步驟（3）中，所述液相色譜為超高壓液相色譜，所述液相色譜的檢測條件為：?色譜柱：?C18色譜柱；柱溫箱溫度30-50?℃；流動相由流動相A和流動相B組成，流動相A為含0.05-0.3?%甲酸的水溶液，流動相B為乙腈溶液，洗脫梯度為：0-1.00?min?5.0%?B，1.00-1.50min?5.0-10.0%?B，1.50-7.50?min?10.0-40.0%?B，7.50-8.50?min?40.0-90.0%?B，8.50-10.00?min?90%?B，10.00-10.50?min?90.0-5.0%?B，10.50-15.00?min，5.0%?B；

所述步驟（3）中，對樣品中的鹽性組分進行閥切換去除，在液相色譜死體積出峰處左右0.1-0.5min內(nèi)設(shè)置閥切換流向為廢液。

2.如權(quán)利要求1所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟（1）中，多肽VV和多肽VN標(biāo)準(zhǔn)品溶液的質(zhì)量濃度為10-100?ng/mL。

3.如權(quán)利要求1所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟（2）中，大豆低聚肽樣品溶液的質(zhì)量濃度為10-1500?μg/mL；所述大豆低聚肽樣品溶液的配制方法為：將大豆低聚肽樣品充分分散于超純水中，攪拌后離心，經(jīng)過濾膜后得到大豆低聚肽樣品溶液。

4.如權(quán)利要求3所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，攪拌的溫度為40-55℃，攪拌的時間為30-60?min，離心的時間為5-25?min，離心的轉(zhuǎn)速為4000-10000?r/min，離心的溫度為0-25?℃，濾膜為水系濾膜、有機濾膜中的至少一種。

5.如權(quán)利要求1所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述液相色譜為超高壓液相色譜時，流動相流速為0.1-0.3mL/min，標(biāo)準(zhǔn)品進樣當(dāng)量0.05-0.35?ng，樣品進樣當(dāng)量0.02-0.2?μg。

6.如權(quán)利要求1所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟（4）中，所用質(zhì)譜為三重四級桿質(zhì)譜、QTOF飛行時間質(zhì)譜中的至少一種；所述質(zhì)譜配備ESI電噴霧離子源，離子源工作模式為正離子模式；質(zhì)譜檢測模式為MRM多反應(yīng)離子監(jiān)測模式，一級前體離子和二級碎裂離子監(jiān)測設(shè)置分別為：VV：一級217.1?m/z，二級118.1、171.4?mz；?VN：一級232.1m/z，二級133.1、72.1mz；去簇電壓設(shè)置為75-85?V，離子碎裂轟擊能量為18-20?eV，質(zhì)譜掃描速率設(shè)置為50-300?Da/s。

7.如權(quán)利要求1所述的大豆低聚肽質(zhì)量控制方法，其特征在于，所述步驟（4）中，采用外標(biāo)法以峰面積對目標(biāo)多肽VV及VN進行定量分析；VV：離子對?217.1/118.1?或217.1/171.4，m/z；VN：離子對232.1/133.1或232.1/72.1，m/z。