[發明專利]一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用

在審

• 申請號: 202210559206.2
• 申請日: 2022-05-22
• 公開（公告）號: CN114910460A
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發明（設計）人: 華子昂;劉寶全;竹添;朱美瑛;張建;萬君興
• 申請（專利權）人: 北京華牛世紀生物技術研究院
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，包括：

S1利用兩個末端分別帶有熒光基團和錨定基團的適配體制備蛋白質芯片，適配體的錨定基團將適配體固定在基片上，淬滅基團通過自身連接的寡核苷酸鏈結合在適配體鏈上且使得適配體的熒光基團無法在激發后發射熒光；

S2將蛋白質芯片與芯片支架組裝為封裝芯片，芯片支架有樣品輸入孔與排出孔，待測樣品溶液通過芯片支架的輸入孔連續輸入到封裝芯片中并不斷從排出孔流出；

S3待測樣品溶液通過芯片支架上的輸入孔進入封裝芯片后，靶標蛋白與適配體識別配對并釋放適配體上結合的淬滅基團，結合靶標蛋白后的適配體上熒光基團可在激發光作用下發射熒光，形成芯片閱讀儀上的陽性信號；

S4芯片閱讀儀根據各種適配體在芯片上的布局與定位信息，輸出確定待測樣品溶液中靶標蛋白類型。

2.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，將同種適配體排列成一行錨定在基片上且垂直于待測樣品溶液的流動方向，有利于捕獲靶標蛋白和提高待測樣品溶液的流動速度。

3.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，適配體的靶標蛋白結合區與淬滅基團的修飾寡核苷酸鏈結合區重合在一起，使得靶標蛋白與適配體結合后會促使淬滅基團釋放。

4.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，靶標蛋白與適配體結合即可釋放淬滅基團并使得適配體上的熒光基團在生物芯片閱讀儀中形成陽性信號，從而實現靶標蛋白的即時檢測，實現POCT應用要求。

5.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，在待測樣品溶液中加入內標蛋白可以實現靶標蛋白的相對定量檢測。

6.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，將多種蛋白對應的特異性適配體及結合的淬滅基團分別錨定在基片的不同位點上，與芯片支架組裝形成基于適配體的蛋白質芯片，可以實現多種蛋白的同步即時檢測。

7.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，待測樣品溶液直接輸入到蛋白質芯片與芯片支架組裝形成的蛋白質檢測空間中，用芯片閱讀儀直接形成POCT檢測結果。

8.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，整個檢測過程僅需要蛋白質提取液一種溶液即可完成樣品中蛋白質提取與靶標蛋白檢測過程。

9.根據權利要求1所述的一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備與應用，其特征在于，基片為透光的固相片狀結構，既可以保證激發光線能夠通過基片照射到基片上錨定的適配體修飾的熒光基團，又能夠保證熒光基團激發后形成熒光信號可以通過透光的基片直接被識別。

10.保護一種基于適配體的蛋白質芯片及其制備在蛋白質檢測領域的應用。