[發明專利]再生小分子miRNA-XU2及其應用

在審

• 申請號: 202210509065.3
• 申請日: 2022-05-11
• 公開（公告）號: CN114807139A
• 公開（公告）日: 2022-07-29
• 發明（設計）人: 許強華;陳良標;李雪;賈若南;葛塞雅;翟萬營
• 申請（專利權）人: 上海海洋大學
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7105;A61P9/00;A61P9/10
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227
• 代理人: 范艷靜

本發明提供了一種再生小分子miRNA?XU2及其應用，該miRNA?XU2的序列如SEQ ID NO.1所示，且該miRNA?XU2在制備受損心臟的心肌細胞再生藥物中得以應用，具體制備促進受損心臟的心肌細胞再生藥物；將小鼠麻醉，注射標記細胞增殖藥物，細胞增殖藥物為5?乙炔基?2'?脫氧尿苷，小鼠心臟造模成功，向造模小鼠的受損心臟注射miRNA?XU2，進行石蠟包埋切片，最后通過熒光染色，觀察細胞增殖信號；通過向小鼠受損心臟注射本發明的miRNA?XU2，可以實現受損心臟心肌細胞的增殖，然后石蠟切片內出現明顯細胞增殖信號，因此miRNA?XU2具有促進小鼠受損心臟的心肌再生的作用。

技術領域

本發明屬于生命科學和生物技術領域，具體涉及一種再生小分子miRNA-XU2及其應用。

背景技術

成年哺乳動物的心臟一直被認為是一種終末分化器官，損傷后再生能力有限。證據表明，新生鼠心臟可以通過增加心肌細胞增殖而再生。而在小鼠出生后7天，這種對損傷作出反應的再生能力就結束了，這與心肌細胞從細胞周期中退出相對應。

小鼠是研究人類心臟發病機理及心臟病治療的一種理想的脊椎動物模型。雖然小鼠和人類的心臟不完全一樣，但二者具有相當高的相似性。人類出現的心臟疾病常常可以在小鼠中重現，使得能在小鼠體內研究人類心臟病發生及對心臟病的治療。

與小鼠類似，人體心臟細胞缺乏修復損傷的能力，這也是心臟病致命的原因之一。各種心臟疾病不可避免地最后轉歸為心力衰竭。在心肌梗死、心力衰竭的發生過程中，心肌細胞的丟失是最主要的病理過程。人類心肌細胞不具有再生能力，一旦損傷則永久喪失。目前的藥物、介入支架等臨床治療手段在一定程度上延緩了疾病的發生，但并不能逆轉心臟病的進展。如何賦予人類心臟心肌細胞的再生增殖能力，為實現受損心臟的修復提供了思路和方向。

發明內容

針對現有技術中的不足，本發明的目的是提供一種再生小分子miRNA-XU2及其應用。通過注射該小分子miRNA-XU2，可以促進小鼠受損心臟的心肌細胞再生。其中，小鼠心臟損傷是采用左心室前降支結扎手術方法制造心肌梗死模型，利用心肌層注射方式注射該小分子RNA。

為達到上述目的，本發明的解決方案是：

一種再生小分子miRNA-XU2，該miRNA-XU2的序列如SEQ ID NO.1所示，即該小分子為使小鼠受損心臟的心肌細胞再生的小分子序列，命名為miRNA-XU2。該小分子RNA序列來自上海吉瑪制藥技術有限公司的化學合成。

一種如上述的再生小分子miRNA-XU2的應用，即該miRNA-XU2在制備受損心臟的心肌細胞再生藥物中的應用。

優選地，miRNA-XU2在制備促進受損心臟的心肌細胞再生藥物中的應用。即通過向受損心臟注射miRNA-XU2，將促進受損心臟的心肌細胞再生。由于BMP2基因是目前已知的心肌再生的重要調控基因，則miRNA-XU2可以靶向促進BMP2基因的表達，從而實現促進受損心臟心肌細胞再生的作用。

優選地，將小鼠麻醉，注射標記細胞增殖藥物，小鼠心臟造模成功，向造模小鼠的受損心臟注射miRNA-XU2，進行石蠟包埋切片，最后通過熒光染色，觀察細胞增殖信號。

優選地，細胞增殖藥物為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷(5-Ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)。

由于采用上述方案，本發明的有益效果是：

通過向小鼠受損心臟注射本發明的miRNA-XU2，可以實現受損心臟心肌細胞的增殖，然后石蠟切片內出現明顯細胞增殖信號，因此miRNA-XU2具有促進小鼠受損心臟的心肌再生的作用。

附圖說明

圖1為本發明的實施例1中小鼠受損心臟注射DEPC水(空白對照)的石蠟切片示意圖。