[發明專利]一種抗原蛋白、其單克隆抗體或多克隆抗體及應用

在審

• 申請號: 202110698736.0
• 申請日: 2021-06-23
• 公開（公告）號: CN114685619A
• 公開（公告）日: 2022-07-01
• 發明（設計）人: 王娜;張旻;景宏麗;呂繼洲;吳紹強;林祥梅
• 申請（專利權）人: 中國檢驗檢疫科學研究院
• 主分類號: C07K14/03
• 分類號: C07K14/03;C07K16/08;C12N15/38;C12N5/20;G01N33/569;G01N33/577;C12R1/91
• 代理公司: 北京悅和知識產權代理有限公司 11714
• 代理人: 司麗春

本發明實施例涉及一種抗原蛋白、其單克隆抗體或多克隆抗體及應用，該抗原蛋白由N段到C段包括通過連接序列依次相連的鯉皰疹病毒2型ORF153蛋白的第45?56位氨基酸、第76?95位氨基酸、124?145位氨基酸、176?281位氨基酸。該去除原始ORF153蛋白中疏水性區域表達的抗原蛋白，其抗原性分析結果顯示優于原始ORF153蛋白，并且利用該抗原蛋白獲得的單克隆抗體或多克隆抗體均可用于鯉皰疹病毒2型的檢測。

技術領域

本發明涉及免疫檢測領域，具體涉及一種抗原蛋白、其單克隆抗體或多克隆抗體及應用。

背景技術

鯉皰疹病毒2型(Cyprinid Herpesvirus 2，CyHV-2)，又稱金魚造血器官壞死病毒(goldfish haematopoietic necrosis virus，GFHNV)，)是一種引起金魚和鯽造血器官壞死病的高致病性病毒，嚴重危害金魚、鯽養殖業。該病毒自1992年在日本首次發現后，迅速蔓延至亞洲、北美洲、大洋洲、歐洲，在我國鯽主養區大規模暴發流行，給金魚、鯽魚養殖產業造成了嚴重的經濟損失。

該病毒是第二個分離自鯉科魚類的皰疹病毒，按照國際病毒系統分類委員會的系統命名規則，將該病毒命名為鯉皰疹病毒2型(CyHV-2)，屬于皰疹病毒目、異樣皰疹病毒科、鯉科皰疹病毒屬，是我國危害極大的鯽造血器官壞死病的病原。CyHV-2是具有囊膜的雙鏈DNA病毒，病毒顆粒直徑為170～220nm，基因全長約為290kbp，G基因和C基因所占比例為51.7％?；蚪M共編碼154個開放閱讀框(Open reading frame，ORF)，其中有4個末端重復序列，整個基因組還有兩個無編碼功能的碎片基因。

Davision等應用先進的生物信息技術對三種鯉科皰疹病毒能夠編碼的蛋白進行預測分析。結果顯示，CyHV-2基因組含有約150個編碼功能蛋白的ORFs，包含一些在三種鯉科皰疹病毒基因組內共有的保守ORFs：如ORF33編碼DNA包裝末端酶亞基；ORF71編碼DNA解旋酶亞基；ORF72編碼病毒衣殼三聯體亞基；ORF78編碼衣殼成熟蛋白酶；ORF79編碼DNA聚合酶亞基等。其余的CyHV-2ORFs中只有少數的功能得到確認，如ORF25、ORF25C和ORF25D能夠編碼膜蛋白；ORF104編碼類激酶蛋白，該蛋白在病毒感染魚體過程中起重要的作用。其他的ORF功能還有待進一步的研究。

本發明選擇的ORF153以ORF153家族的形式存在于CyHV-2基因組中，預測ORF153蛋白家族為3型膜蛋白，雖然蛋白功能分析顯示ORF153編碼蛋白為膜蛋白，但未見具體的驗證，其深入的功能定位還不清楚，更多相關研究仍有待開展。

目前已有很多CyHV-2的檢測診斷方法，但在實際廣泛應用中主要還是基于分子的檢測技術，血清學診斷并沒有得到廣泛的應用。尤其是對于潛伏感染的宿主來說，基于分子的檢測并不能判斷宿主體內是否存在病毒，而血清學診斷技術能彌補這個缺陷?；诿庖邔W的抗原檢測方法的建立，需要有能特異性識別CyHV-2的抗體。

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

發明內容

發明目的

本發明的目的在于提供一種抗原蛋白、其單克隆抗體或多克隆抗體及其在制備檢測鯉皰疹病毒2型的試劑盒中的應用。該去除原始ORF153蛋白中疏水性區域的抗原蛋白，其抗原性分析結果顯示優于原始ORF153蛋白，并且利用該抗原蛋白獲得的單克隆抗體或多克隆抗體均可用于鯉皰疹病毒2型的檢測。

解決方案