[發明專利]一種負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒的制備方法

在審

• 申請號: 202210478417.3
• 申請日: 2022-05-05
• 公開（公告）號: CN114712327A
• 公開（公告）日: 2022-07-08
• 發明（設計）人: 王娜;孫妍;陳長蘭;肖志剛;趙鳳芹;譚蓮興
• 申請（專利權）人: 遼寧大學
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K31/12;A61K47/42;A61K47/36;A61P3/10;A61P9/00;A61P25/00;A61P29/00;A61P31/04;A61P31/12;A61P35/00;A61P39/06;A23L33/105;A23P10/30
• 代理公司: 沈陽杰克知識產權代理有限公司 21207
• 代理人: 羅瑩

1.一種負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)將脫脂米糠與5倍體積的去離子水混合，將混合物均質3～5min后常溫下攪拌1～2h，使用3.0M氫氧化鈉將混合物pH調至9.5，于55℃下磁力攪拌1～2h，然后在室溫下以10000r/min離心30min，離心上清液于紗布過濾后，用2.0M鹽酸將濾液pH調至為4.4，靜置30min后，在室溫下以10000r/min離心30min取沉淀，用去離子水洗滌沉淀2次得中性蛋白溶液，在-20℃下冷凍24h，然后置于凍干機中，0.1～0.5mbar、-60℃～-50℃下冷凍干燥48h，得到米糠蛋白；

2)將步驟1)得到的米糠蛋白溶解于去離子水中，配制成10mg/mL的米糠蛋白溶液，用1.0M氫氧化鈉調整溶液的pH，得到米糠蛋白儲備液；

3)在常溫下，將NaCl溶液置于轉速為600r/min的磁力攪拌器上，邊攪拌邊加入步驟2)得到的米糠蛋白儲備液以及酪蛋白酸鈉儲備液，然后用1.0M氫氧化鈉將混合液pH調至10.0～12.0，繼續磁力攪拌30min后，在黑暗條件下加入姜黃素-乙醇溶液，充分混合均勻后，加入阿拉伯膠儲備液，繼續攪拌1～2h，旋轉蒸發除去乙醇，用0.05M鹽酸緩慢調整混合體系的pH，最后以3000r/min離心10min，取離心上清液，得到負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒水溶液；

4)將步驟3)得到的負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒水溶液在-20℃下冷凍24h，然后置于凍干機中，0.1～0.5mbar、-60℃～-50℃下冷凍干燥48h，得到負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟2)中，所述米糠蛋白儲備液的pH為10.0～12.0。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述NaCl溶液的濃度為5～25mmol/L。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述酪蛋白酸鈉儲備液的制備方法：將酪蛋白酸鈉粉末溶解于去離子水中，得到10mg/mL的酪蛋白酸鈉儲備液。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述姜黃素-乙醇溶液的制備方法：將姜黃素粉末溶解于無水乙醇中，得到0.15mg/mL的姜黃素-乙醇溶液，4℃避光保存備用。

6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述阿拉伯膠儲備液的制備方法：將阿拉伯膠粉末溶解于去離子水中，得到10mg/mL的阿拉伯膠儲備液。

7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，按體積比，NaCl溶液:米糠蛋白儲備液:酪蛋白酸鈉儲備液:姜黃素-乙醇溶液:阿拉伯膠儲備液＝15:1:0.5～2.5:18～21:2。

8.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，步驟3)中，所述混合體系的pH為4.0～4.8。

9.根據權利要求1-8任意一項所述的一種負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒的制備方法，其特征在于，所述的負載姜黃素的米糠蛋白-阿拉伯膠-酪蛋白酸鈉納米顆粒粒徑為310.2～1000nm，PDI為0.136～0.491，Zeta電位為-14.2～-20.2mV，姜黃素包埋率為58.3～98.5％，姜黃素在模擬胃液的生物利用度為15.1～18.3％，在模擬腸液的生物利用度為23.1～27.2％。