[發明專利]一種膜蛋白工程化外泌體及其制備方法在審
| 申請號： | 202210469355.X | 申請日： | 2022-04-30 |
| 公開（公告）號： | CN114807046A | 公開（公告）日： | 2022-07-29 |
| 發明（設計）人： | 孫振;崔恒宓 | 申請（專利權）人： | 江蘇易諾維生物醫學研究院有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/10 | 分類號： | C12N5/10;C12N15/62;C12N15/867;C12N15/66 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 211100 江蘇省南京市江寧區蘇源大道1*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 膜蛋白 工程 化外 及其 制備 方法 | ||
1.一種膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述膜蛋白工程化外泌體是由外泌體膜蛋白慢病毒表達載體穩轉細胞后，分離獲得的；
所述外泌體膜蛋白慢病毒表達載體是由具有外泌體膜定向表達功能序列的慢病毒載體以及目的蛋白構建而成；
所述外泌體膜蛋白慢病毒表達載體的骨架載體為plvx-IRES-Puro；
所述外泌體膜蛋白慢病毒表達載體的功能序列結構，其從N端起，依次是外泌體膜蛋白的信號肽序列、外源基因插入區、鉸鏈區、外泌體膜蛋白的跨膜區序列和胞內序列。
2.根據權利要求1所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述外泌體膜蛋白的信號肽序列和所述外泌體膜蛋白的跨膜區序列皆來源于LAMP2B。
3.根據權利要求1所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述外源基因插入區為XhoⅠ-XbaⅠ限制性內切酶酶切位點。
4.根據權利要求1所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述鉸鏈區序列來源于CD8。
5.根據權利要求2所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述LAMP2B N端信號肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
6.根據權利要求2所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述LAMP2B跨膜區的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
7.根據權利要求3所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述XhoⅠ-XbaⅠ限制性內切酶酶切位點的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
8.根據權利要求4所述的膜蛋白工程化外泌體，其特征在于：所述CD8鉸鏈區的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。
9.一種如權利要求1-8任一項所述的膜蛋白工程化外泌體的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：
(1)構建含有外泌體膜蛋白基因的慢病毒表達載體；
(2)所述慢病毒表達載體感染HEK293T細胞，嘌呤霉素篩選穩轉細胞系；
(3)所述穩轉HEK293T細胞分泌膜蛋白工程化外泌體。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于江蘇易諾維生物醫學研究院有限公司，未經江蘇易諾維生物醫學研究院有限公司許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202210469355.X/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種定位方法和系統
- 下一篇：一種改性酚醛樹脂及其制備方法
