[發(fā)明專利]一株防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌及其應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210448299.1
• 申請日: 2022-04-27
• 公開（公告）號: CN114891667A
• 公開（公告）日: 2022-08-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 黎妍妍;李錫宏;鄭露;楊勇;許汝冰
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北省煙草科學研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/22;A01N43/653;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 南京縱橫知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32224
• 代理人: 徐瑛

1.一株防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌(Bacillus sp.)K11已于2021年3月26日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為CCTCC NO：M 2021284。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌，其特征在于，所述枯草芽孢桿菌K11的16S rDNA的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

3.一種防治煙草炭疽病的菌劑，其特征在于，所述菌劑包含權(quán)利要求1所述的防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌K11。

4.權(quán)利要求3所述的防治煙草炭疽病的菌劑的制備方法，其特征在于，所述制備方法包括以下步驟：

S1、將所述防治煙草炭疽病的枯草芽孢桿菌K11在LB固體平板培養(yǎng)基上活化；

S2、從步驟S1所述LB固體平板培養(yǎng)基上挑取單菌落接種到LB液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)得種子液；

S3、以2v/v％～3v/v％的接種量將種子液接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中培養(yǎng)得發(fā)酵液，調(diào)節(jié)發(fā)酵液中菌液濃度至所需范圍即得所述防治煙草炭疽病的菌劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治煙草炭疽病的菌劑的制備方法，其特征在于，所述LB固體平板培養(yǎng)基的成分包括：10g/L胰蛋白胨，5g/L酵母提取物，10g/L NaCl，15g/L瓊脂粉，pH為7.2；所述LB液體培養(yǎng)基的成分包括：10g/L胰蛋白胨，5g/L酵母提取物，10g/L NaCl，pH為7.2；所述發(fā)酵培養(yǎng)基的成分包括：40.0g/L玉米淀粉，50.0g/L豆粕，2.00g/L KH₂PO₄，0.50g/L MgSO₄·7H₂O，0.50g/L KCl，0.10g/L FeSO₄·7H₂O，pH為6.8～7.0。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治煙草炭疽病的菌劑的制備方法，其特征在于，步驟S2中在30±2℃下、150r/min振蕩培養(yǎng)20小時，得所述種子液；步驟S3中在30±2℃下、150r/min振蕩培養(yǎng)30～36小時，得所述發(fā)酵液。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的防治煙草炭疽病的菌劑的制備方法，其特征在于，步驟S3中調(diào)節(jié)發(fā)酵液中菌液濃度至1×10⁸～1×10⁹CFU/mL。

8.權(quán)利要求2所述的防治煙草炭疽病的菌劑用于防治煙草炭疽病的方法，其特征在于，包括以下步驟：

P1、在煙苗移栽時，將大黃金的煙苗種植于煙田的邊緣，在煙田其他區(qū)域種植主栽品種煙苗；其中，大黃金與主栽品種的株數(shù)比為1:(40～50)；

P2、煙苗移栽30d后，每天觀察大黃金煙株炭疽病的發(fā)病情況；當發(fā)現(xiàn)大黃金出現(xiàn)炭疽病癥狀時，對主栽品種煙葉葉面噴施菌劑稀釋液，用量為40～50kg/畝；當主栽品種出現(xiàn)炭疽病時，分兩次對主栽品種煙葉葉面噴施復(fù)配殺菌劑的稀釋液，所述復(fù)配殺菌劑每次用量為100～120mL/畝，兩次噴施的間隔時間為10～15d；所述菌劑稀釋液是用所述菌劑、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉和水配制而成；所述復(fù)配殺菌劑是用所述菌劑、三唑類殺菌劑、木質(zhì)素磺酸鈉、十二烷基硫酸鈉配制而成。