[發(fā)明專利]獼猴桃胞外囊泡及其在藥物載體中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210446091.6
• 申請(qǐng)日: 2022-04-26
• 公開（公告）號(hào): CN114774348A
• 公開（公告）日: 2022-07-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉克海;方舟
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/04
• 分類號(hào): C12N5/04;A61K47/46;A61K31/44;A61K9/127;A61P35/00
• 代理公司: 上海伯瑞杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31227
• 代理人: 周一新

1.一種獼猴桃胞外囊泡的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)挑選新鮮的獼猴桃去皮并擠壓，得到獼猴桃汁液；

(2)步驟(1)獲得的獼猴桃汁液經(jīng)過若干次由低到高的差速離心去除植物纖維、細(xì)胞碎片沉淀，得到上清液；

(3)步驟(2)獲得的上清液過0.45μm濾膜，濾液經(jīng)超高速離心，保留沉淀，得到低純度的獼猴桃胞外囊泡沉淀；

(4)步驟(4)獲得的低純度的獼猴桃胞外囊泡沉淀溶解于PBS中，經(jīng)蔗糖濃度梯度離心法離心，收集30％-45％條帶的溶液，經(jīng)PBS沖洗，超高速離心，得到高純度的獼猴桃胞外囊泡。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述獼猴桃胞外囊泡的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，獼猴桃去皮并擠壓后過200目濾布。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述獼猴桃胞外囊泡的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述差速離心的過程為：300g，10min×2；1000g，10min×2；3000g，10min×2；10000g，30min×2；20000g，30min×2。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述獼猴桃胞外囊泡的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，所述超高速離心為120000g離心2小時(shí)。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述獼猴桃胞外囊泡的制備方法，其特征在于，步驟(4)中，所述蔗糖濃度梯度離心法中蔗糖濃度梯度分別為8％、15％、30％、45％和60％。

6.一種獼猴桃胞外囊泡，通過權(quán)利要求1至5任一項(xiàng)所述獼猴桃胞外囊泡的制備方法制備得到。

7.權(quán)利要求6所述的獼猴桃胞外囊泡在藥物載體中的應(yīng)用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于，所述獼猴桃胞外囊泡作為藥物載體包載抗癌藥物。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抗癌藥物為索拉非尼，其中所述獼猴桃胞外囊泡與索拉非尼的質(zhì)量比為1-20：1。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述獼猴桃胞外囊泡與索拉非尼的質(zhì)量比為10：1。