[發明專利]一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法

在審

• 申請號: 202210398625.2
• 申請日: 2022-04-15
• 公開（公告）號: CN114606281A
• 公開（公告）日: 2022-06-10
• 發明（設計）人: 王貴;孫雪梅;鐘啟文;王麗慧
• 申請（專利權）人: 青海省農林科學院
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;C12P19/14;C12Q3/00;G01N30/02
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 符繼超

1.一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)制備菊苣根莖粉：

將菊苣根莖洗干凈，切成薄片，烘干至恒重，粉碎，過篩，得菊苣根莖粉；

(2)提取果聚糖：

將菊苣根莖粉倒入試管中，然后加入雙蒸水，沸水浴30min，放至室溫，離心處理，并將上清液轉移至容量瓶中，重復以上操作，合并兩次上清液，定容，即為果聚糖提取液；

(3)單因素試驗：

制定酶解基本條件為：酶底比6％、酶解時間80min和酶解溫度40℃，固定其中兩個條件，改變另一個條件，分別研究三個因素的影響，確定較佳的因素水平；

(4)正交試驗法優化酶解工藝：在單因素試驗結果的基礎上，分別選取酶底比、酶解時間和酶解溫度三個因素較佳的三個水平進行L9(3⁴)正交試驗；

(5)HPLC法分別檢測步驟(2)(3)(4)待測液的葡萄糖和果糖含量，按以下公式計算果聚糖含量：

果聚糖含量(mg/mL)＝k(G+F)，k＝[180+162(n-1)]/180n

其中n：待測液平均聚合度；G：待測液果糖含量；F：待測液葡萄糖含量；

(6)確定最佳酶解條件。

2.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(1)中所述烘干溫度為65℃，過篩為過40目篩。

3.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(2)中所述菊苣根莖粉與雙蒸水的質量體積比為0.5g：20mL；所述離心的轉速為12000r/min；離心時間為10min。

4.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(3)中所述酶解中用到的酶為菊糖酶，酶活性為60000U/g。

5.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(3)中所述單因素試驗中酶解取值為：酶底比為4％、5％、6％、7％、8％；酶解時間為80min、90min、100min、110min、120min、130min；酶解溫度為30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃。

6.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(4)正交試驗法優化酶解工藝中三個因素三個水平取值為：酶底比為5％、6％、7％；酶解時間為100min、110min、120min；酶解溫度為40℃、45℃、50℃。

7.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(5)中待測液在檢測前先通過孔徑為0.22μm的濾膜。

8.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(5)中HPLC檢測法中檢測參數為：Shodex SUGAR SC1011色譜柱，示差檢測器RID-10A，柱溫80℃，進樣量5μL，流動相為雙蒸水，流速1mL/min。

9.根據權利要求1所述的一種酶解菊苣果聚糖工藝優化方法，其特征在于，步驟(6)中所述最佳酶解條件為：酶底比7％，酶解時間110min，酶解溫度45℃。