[發明專利]生物標志物在HBV相關肝癌診斷及預后中的應用

有效

• 申請號: 202210390496.2
• 申請日: 2022-04-14
• 公開（公告）號: CN114836538B
• 公開（公告）日: 2023-04-07
• 發明（設計）人: 晏少穎;龔彬彬
• 申請（專利權）人: 南昌大學第一附屬醫院
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 宮建華

本發明提供一種檢測lncRNA的表達水平的試劑在制備診斷HBV相關肝癌或預測HBV相關肝癌預后的產品中的應用，所述lncRNA為AC005332.5、ELF3?AS1和LINC00665，該標志物組合具有高特異性和靈敏度，能夠作為HBV相關肝癌的有效診斷標記，并且其表達水平與HBV相關肝癌分期、分級及總體存活率相關，可應用于HBV相關肝癌的預后判斷。

技術領域

本發明涉及醫學生物檢測技術領域，具體地說，涉及血清標志物在HBV相關肝癌的診斷及預后判斷中的應用。

背景技術

原發性肝細胞肝癌（Hepatocellular?carcinoma，HCC，以下簡稱肝癌）是臨床最常見的惡性腫瘤之一，近年來其致死率已躍居惡性腫瘤中的第三位，嚴重威脅著人類的生命健康。乙型肝炎病毒（hepatitis?B?virus，HBV）被認為是肝癌進展的關鍵危險因素，甚至是主要的病因。雖然治療手段如手術、移植和射頻消融術有了進步，但由于腫瘤的高侵襲性和復發率，HBV相關的肝癌患者的總體生存率仍較低。且對于大多數HBV相關的肝癌患者，在診斷時已經進展到中晚期，已出現局部腫瘤侵犯血管，及淋巴結和遠處轉移，喪失手術機會。目前，組織活檢和病理檢查是肝癌診斷的“金標準”，然而由于其有創性，臨床應用有限。而臨床上使用最廣泛的肝癌血清標志物是AFP，但是隨著AFP陰性患者的增多，肝癌患者漏檢增多，直接影響肝癌患者的早期診斷和預后評價。因此尋找更有效的、敏感的HBV相關的肝癌診斷和預后相關的新型無創標志物具有重要意義。

長鏈非編碼RNA（Long?non-coding?RNA，lncRNA）是長度超過200個核苷酸的非編碼RNA，在基因組轉錄過程中廣泛存在，曾被認為不具有任何生物學功能，作為RNA聚合酶II轉錄的副產物，被稱為是基因組轉錄的“暗物質”，但隨著這些年以來分子生物學技術的不斷發展和進步，現有越來越多的研究發現，這些之前所謂的基因組“暗物質”可調控細胞分化、細胞凋亡等多種生物學過程，并在癌癥的發生發展中發揮重要作用。而lncRNA與腫瘤之間關系的研究多使用的組織標本。組織標本的獲取為有創過程，獲取病變部位不一定準確，不適合早期診斷，也不適用于高危人群的篩查。血清標本采集簡便，創傷性小，而且可以同時獲得多個腫瘤相關指標。因此可以研究血液標本中lncRNA與腫瘤發生發展的關系。由于肝癌的發生發展過程中涉及復雜的病理改變，因此進一步探索lncRNA與HBV相關肝癌的關系，建立lncRNA分子聯合檢測模型對了解HBV相關肝癌的發生發展及診斷預后具有重大意義。

發明內容

為了克服現有技術的缺陷，本申請發明人經過研究，從大批的癌癥標志物中篩選得到了可潛在應用于HBV相關肝癌診斷及預后判斷的標志物組合，所述標志物組合是AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665。本發明驚奇地發現，該標志物組合具有高特異性和靈敏度，能夠作為HBV相關肝癌的有效診斷標記，并且其表達水平與HBV相關肝癌分期、分級及總體存活率相關，可應用于HBV相關肝癌的預后判斷。

本發明提供如下技術方案：

本發明提供了一種診斷HBV相關肝癌或預測HBV相關肝癌預后的產品，所述產品包括檢測AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665的表達水平的試劑。

作為本發明優選的實施方案，所述所述產品包括通過PCR、原位雜交、或高通量測序平臺檢測AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665表達水平的試劑。

作為本發明優選的實施方案，所述試劑包括特異性針對所述AC005332.5、ELF3-AS1和LINC00665的探針或引物。

進一步，所述引物序列為：

所述AC005332.5的正向引物為AGAACCCTGGACCCTAGCATTGG（SEQ?ID?NO?1）；

所述AC005332.5的反向引物為TAGCCACTCGCACATCCTCCTC（SEQ?ID?NO?2）；