[發明專利]TMEM144在制備腫瘤藥物中的應用

有效

• 申請號: 202210374130.6
• 申請日: 2022-04-11
• 公開（公告）號: CN115161392B
• 公開（公告）日: 2023-05-16
• 發明（設計）人: 胡陽;陳國兵;秦衛兵;聶華
• 申請（專利權）人: 廣東省生殖科學研究所（廣東省生殖醫院）
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;A61K31/7105;A61P15/00;A61P35/00
• 代理公司: 廣州高炬知識產權代理有限公司 44376
• 代理人: 高雁

本發明公開了TMEM144在制備腫瘤藥物中的應用；具體公開了TMEM144基因或其抑制劑在制備宮頸癌的診斷或治療藥物中的應用以及與該基因相關的藥物篩選方法和疾病診斷設備。本發明通過還提供了一種含有hsa?miR?23a或hsa?miR?23a?mimics的宮頸癌治療藥物，該藥物能夠通過提高細胞內hsa?miR?23a的含量，從而抑制TMEM144基因的表達實現對宮頸癌的抑制。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，具體涉及TMEM144在制備腫瘤藥物中的應用、存儲介質及電子設備。

背景技術

小干擾RNA(small?interfering?RNA，siRNA)一般是20-25bp的雙鏈短RNA鏈，它可以通過降解mRNA，干擾翻譯過程，從而降低蛋白質的表達水平。通過脂質體轉染、電轉等方式，直接將siRNA導入細胞后，細胞內的一種特殊蛋白復合體(RISC復合體)能夠和siRNA結合，解開其雙鏈，使雙鏈RNA變為單鏈RNA。打開的單鏈RNA能夠和mRNA上的互補序列結合，然后RISC復合體會切斷與其互補的mRNA序列。完成這一系列操作后，RISC-siRNA復合體帶著單鏈的siRNA，會從切斷的mRNA上解脫，再去結合、降解其他的mRNA。基因的mRNA被切斷以后，就不能進行后續的蛋白翻譯，無法合成蛋白質。因此，蛋白質的表達水平下降，基因的功能被沉默掉。除了直接導入siRNA到細胞內，還可以導入siRNA的前體——長雙鏈RNA進入細胞。長雙鏈RNA進入細胞后，會被細胞內部的Dicer酶切割，生成siRNA，進而敲減相應的基因。除長雙鏈RNA外，短發卡RNA(shRNA)也可以作為siRNA的前體。shRNA被切割成siRNA后，也可以敲減目標基因。siRNA在細胞內屬于消耗品，消耗完之后，mRNA的表達便不再被抑制，蛋白水平也會恢復。因此，siRNA的敲減是一種瞬時的作用。

短發卡RNA(short?hairpin/small?hairpin?RNA，shRNA)是一種短的頸環結構，類似發卡。shRNA一般通過質粒病毒等載體導入細胞內。以病毒載體為例，導入的shRNA是以DNA形式存在。在細胞核內，載體上相應的序列會轉錄出pri-miRNA，這是一種具有頸環結構的小RNA(microRNA,miRNA)。細胞內的Drosha酶會修剪pri-miRNA的兩端序列，使其變成小RNA，這正是shRNA的前體(pre-shRNA)。pre-shRNA會走出細胞核，到達細胞質。進入細胞質以后，pre-shRNA便形成了成熟的shRNA。shRNA在Dicer酶作用下，環狀結構被切掉，只剩下發卡的“莖”，這是核心的siRNA序列。siRNA會以上述同樣的機制，發揮基因敲減的作用。shRNA需要經細胞內的酶進行切割，才能轉變成siRNA而發揮作用。與siRNA的瞬態效果相比，shRNA可以通過病毒載體整合到基因組，因此可以穩定表達，長久持續地發揮作用。

miRNA小分子核糖核酸/微核糖核酸(microRNA)，真核生物中廣泛存在的一種長約22nt(21-24nt)的核糖核酸分子，成熟的miRNA為單鏈RNA，通過降解靶標mRNA或抑制蛋白質翻譯調節目標基因的表達。

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，其發病率和死亡率均高居女性惡性腫瘤第四位，嚴重危害女性健康。NCBI對人源TMEM144蛋白序列注釋信息為345個氨基酸構成，分子量在37.6kD。對TMEM144進行跨膜區分析發現TMEM144為5+5TM跨膜蛋白，含有10個跨膜區，且由兩個結構域組成，分別為CEO?family(DUF1632)和Sugar?transport蛋白家族，NCBI對該蛋白的注釋信息為碳水化合物轉運蛋白。目前關于TMEM144的功能研究目前有兩篇文獻提到，El-Heliebi報道TMEM144可能參與脊索瘤細胞表型分型。此外，Prentice等發現TMEM144在鼠下丘腦中與GPR54/kisspeptin?signalling通路是密切相關的，且該信號通路參與了青春期促性腺激素釋放激素(GnRH)的分泌。而TMEM144具體的功能以及與宮頸癌的關系尚未文獻報道。

發明內容