[發(fā)明專利]一種篩選不受補(bǔ)體干擾的單克隆抗體對(duì)的方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202210292730.8 | 申請(qǐng)日： | 2022-03-23 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN114594261A | 公開（公告）日： | 2022-06-07 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 何進(jìn)軍;葛超坤;章成龍;賈江花;瑞亞·富蘭克林·沃克曼;鄒繼華;葉邦策 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 美康生物科技股份有限公司 |
| 主分類號(hào)： | G01N33/577 | 分類號(hào)： | G01N33/577;G01N21/76 |
| 代理公司： | 浙江中桓凱通專利代理有限公司 33376 | 代理人： | 李美寶 |
| 地址： | 315000 浙江*** | 國(guó)省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說(shuō)明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 篩選 不受 補(bǔ)體 干擾 單克隆抗體 方法 | ||
1.一種篩選不受補(bǔ)體干擾的單克隆抗體對(duì)的方法，其特征在于，包括以下步驟：
S10：獲得陰性樣本混合物；
S20：在所述陰性樣本混合物中加入抗原，獲得檢測(cè)樣本一；
S30：對(duì)所述陰性樣本混合物進(jìn)行加熱，并加入所述抗原，獲得檢測(cè)樣本二；
S40：在所述檢測(cè)樣本二中加入補(bǔ)體C1q，獲得檢測(cè)樣本三；
S50：用待選單克隆抗體對(duì)制備的化學(xué)發(fā)光試劑，對(duì)所述檢測(cè)樣本一、檢測(cè)樣本二和檢測(cè)樣本三分別進(jìn)行免疫化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，獲得檢測(cè)結(jié)果一、檢測(cè)結(jié)果二、檢測(cè)結(jié)果三；
S60：根據(jù)所述檢測(cè)結(jié)果一、所述檢測(cè)結(jié)果二、所述檢測(cè)結(jié)果三，獲得所述不受補(bǔ)體干擾的單克隆抗體對(duì)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述S10包括以下步驟：
S11：獲取陰性樣本；
S12：測(cè)定所述陰性樣本的C1q含量，獲得檢測(cè)結(jié)果；
S13：根據(jù)所述檢測(cè)結(jié)果，將所述陰性樣本進(jìn)行分類，并獲得所述陰性樣本混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述將所述陰性樣本進(jìn)行分類，并獲得陰性樣本混合物包括以下步驟：
S14：將C1q含量大于220μg/mL的所述陰性樣本混合標(biāo)記為高補(bǔ)體陰性樣本混合物，C1q大于170μg/mL且小于220μg/mL的所述陰性樣本混合標(biāo)記為中補(bǔ)體陰性樣本混合物，C1q小于170μg/mL的所述陰性樣本混合標(biāo)記為低補(bǔ)體陰性樣本混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述對(duì)所述陰性樣本混合物進(jìn)行加熱，加熱溫度為50-55℃，加熱時(shí)間為10-15min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述S60包括以下步驟：
S61：根據(jù)所述檢測(cè)結(jié)果一、所述檢測(cè)結(jié)果二、所述檢測(cè)結(jié)果三，計(jì)算變化比例，在所述檢測(cè)結(jié)果一和所述檢測(cè)結(jié)果二的變化比例的差值小于10％，且所述檢測(cè)結(jié)果二和所述檢測(cè)結(jié)果三的變化比例的差值小于10％的情況下，所述待選單克隆抗體對(duì)不受所述補(bǔ)體影響；
S62：獲得所述不受補(bǔ)體干擾的單克隆抗體對(duì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述檢測(cè)樣本一和所述檢測(cè)樣本二中的所述陰性樣本混合物、所述抗原的添加量相同。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述S40之前包括以下步驟：
S31：收集血清；
S32：純化所述血清中的C1q，獲得粗純品；
S33：進(jìn)一步純化所述粗純品，獲得補(bǔ)體C1q。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述S40包括以下步驟：
S41：在所述檢測(cè)樣本二中加入所述補(bǔ)體C1q，獲得所述檢測(cè)樣本三。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述免疫化學(xué)發(fā)光檢測(cè)包括以下步驟：
S44：制備發(fā)光試劑；
S45；制備固相試劑；
S46：將所述發(fā)光試劑、所述固相試劑分別與所述檢測(cè)樣本一、所述檢測(cè)樣本二、所述檢測(cè)樣本三進(jìn)行混合，利用化學(xué)發(fā)光免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)。
10.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述測(cè)定所述陰性樣本的C1q含量采用補(bǔ)體C1q診斷試劑盒。
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