[發明專利]一種羥基酪醇的生產方法

有效

• 申請號: 202210291600.2
• 申請日: 2022-03-23
• 公開（公告）號: CN114591975B
• 公開（公告）日: 2023-10-03
• 發明（設計）人: 蔡宇杰;燕毅;丁彥蕊;白亞軍;鄭曉暉
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N15/54;C12N1/21;C12N15/70;C12P7/22;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 仇鈺瑩

1.一種重組大腸桿菌，其特征在于，表達了單胺氧化酶、醇脫氫酶和葡萄糖脫氫酶，可利用多巴胺生產羥基酪醇。

2.根據權利要求1所述的重組大腸桿菌，其特征在于，所述單胺氧化酶來源于Micrococcus luteus、Escherichia coli str.K-12、Bacillus subtilis或Paenarthrobacter aurescens；所述醇脫氫酶來源于Escherichia coli、Limosilactobacillus reuteri、Proteus mirabilis或Synechocystis sp.；所述葡萄糖脫氫酶來源于Bacillus subtilis。

3.根據權利要求1或2所述的重組大腸桿菌，其特征在于，所述重組大腸桿菌通過不同強度的RBS調控酶的表達強度，所述RBS選自SEQ ID NO.1～8任一。

4.根據權利要求1～3任一所述的重組大腸桿菌，其特征在于，所述重組大腸桿菌還組成型表達來源于ureibacillus thermosphaericus的過氧化氫酶，所述過氧化氫酶的氨基酸序列如GenBank：WP_016837596.1所示。

5.根據權利要求1～4任一所述的重組大腸桿菌，其特征在于，所述重組大腸桿菌還組成型表達來源于鼠傷寒沙門氏菌(Salmonella typhimurium)的煙酸磷酸核糖基轉移酶。

6.一種可利用多巴胺生產羥基酪醇的細胞催化劑，其特征在于，含有(a)或(b)：

(a)權利要求1～5任一所述的重組大腸桿菌；

(b)表達了單胺氧化酶、醇脫氫酶和葡萄糖脫氫酶中一種或兩種酶的重組大腸桿菌細胞的組合。

7.根據權利要求6所述的細胞催化劑，其特征在于，所述組合含有：

表達單胺氧化酶的重組大腸桿菌，和表達醇脫氫酶的重組大腸桿菌，和表達葡萄糖脫氫酶的重組大腸桿菌；或

表達單胺氧化酶和醇脫氫酶的重組大腸桿菌，和表達葡萄糖脫氫酶的重組大腸桿菌；或

表達單胺氧化酶和葡萄糖脫氫酶的重組大腸桿菌，和表達醇脫氫酶的重組大腸桿菌；或

表達醇脫氫酶和葡萄糖脫氫酶的重組大腸桿菌，和表達單胺氧化酶的重組大腸桿菌。

8.一種生產羥基酪醇的方法，其特征在于，應用權利要求1～6任一所述的重組大腸桿菌或權利要求7～8任一所述的細胞催化劑，在含多巴胺的體系中催化生產羥基酪醇。

9.一種生產羥基酪醇的方法，其特征在于，應用權利要求1～3任一所述的重組大腸桿菌，在含多巴胺和過氧化氫酶的體系中催化生產羥基酪醇。

10.權利要求1～5任一所述的重組大腸桿菌，或權利要求6～7任一所述的細胞催化劑，或權利要求8～9任一所述的方法在生產含羥基酪醇的產品中的應用。