[發明專利]一種與花生白種皮緊密連鎖的分子標記AhyWptc及其應用有效
| 申請號： | 202210270304.4 | 申請日： | 2022-03-18 |
| 公開（公告）號： | CN114525364B | 公開（公告）日： | 2022-08-26 |
| 發明（設計）人： | 夏晗;黃懷玲;鄧麗;王興軍;趙傳志;任麗;馬婧;田銳錚;張憲英;侯蕾;李陽 | 申請（專利權）人： | 山東省農業科學院;開封市農林科學研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11;A01H1/04 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 張換君 |
| 地址： | 250100 *** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 花生 白種 緊密 連鎖 分子 標記 ahywptc 及其 應用 | ||
1.一種利用特異性引物對鑒定白種皮花生的方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）提取花生子葉組織DNA；
（2）采用如SEQ ID NO：1-2所示的特異性引物對對步驟（1）提取的DNA進行PCR擴增；
（3）對步驟（2）得到的擴增產物進行非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測，若出現210bp大小的特征條帶，則判定待測花生材料下代種子為白種皮；
所述花生的品種為FZ001。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（2）中，擴增體系為：DNA模板1μL，正向引物和反向引物各1μL，2×NG PCR MasterMix 10μL，加水至20μL。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（2）中，擴增反應程序為：預變性94℃ 5 min；94℃ 30s，55℃ 30s，72℃ 30s，35個循環；72℃延伸7min。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟（3）中，所述非變性聚丙烯酰胺凝膠的配方為：40%丙烯酰胺18 mL、5×TBE 18 mL、H2O 54 mL、20%過硫酸銨800μL和TEMED 80 μL。
5.一種鑒定白種皮花生的試劑盒，其特征在于，包含如SEQ ID NO：1-2所示的特異性引物對；所述花生的品種為FZ001。
6.一種特異性引物對在鑒定白色種皮花生中的應用，其特征在于，所述特異性引物對的核苷酸序列如SEQ ID NO：1-2所示；所述花生的品種為FZ001。
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