[發明專利]一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法

在審

• 申請號: 202210270125.0
• 申請日: 2022-03-18
• 公開（公告）號: CN114705771A
• 公開（公告）日: 2022-07-05
• 發明（設計）人: 賴長生;袁峰;徐清霞;岑素玉;吳敏嫦;梁永輝;梁偉偉;陳家豪;周國鋒;陳穎芯;顧浩全
• 申請（專利權）人: 廣東中科英睿檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/12;G01N30/60
• 代理公司: 北京一枝筆知識產權代理事務所(普通合伙) 11791
• 代理人: 黃煒

1.一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟S1：取蔬果原料充分洗凈，去除不可食用部分，放入裝有高強度紫外光的容器中，保持15rain消毒，消毒后于60-70℃烘干至恒重，進行粉碎；

步驟S2：準確稱取粉碎好的蔬果原料30-50g，放入燒杯，加入20ml 80％的乙醇，常溫浸泡4-6h，過濾后再加入10ml 80％的乙醇，常溫浸泡1-2h，再次過濾；

步驟S3：將步驟S2中濾液在70-80℃水浴內加熱蒸干，再加入10-20ml檸檬酸和磺基水楊酸的混合液，充分溶解后，定容至20ml，離心分離，取上清液保留；

步驟S4：準確稱取粉碎好的蔬果原料30-50g，放入水解試管中，加入10-20ml鹽酸，再加入1ml去離子水，充分混合，封口后抽至負壓，在105-115℃電熱恒溫箱中水解18-24h，取出過濾，定容至20ml；

步驟S5：各取步驟S4中10ml定容液放置于蒸發盤中，在70-80℃蒸干30-40min，直至鹽酸除盡，在分別加入10ml檸檬酸鈉緩沖液，完全溶解后離心分離，取上清液保留；

步驟S6：準確吸取0.2ml混合氨基酸標準，用緩沖液稀釋到5ml，作為上機測定用的氨基酸標準；

步驟S7：分別將保留的上清液于氨基酸自動分析儀測定，對游離氨基酸和水解氨基酸進行測定。

2.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述氨基酸的測定公式為：

上機樣本液中氨基酸含量＝上機標準液中氨基酸量*氨基酸標準峰面積

即，Ag樣本中的氨基酸的mg數＝上機樣本中氨基酸量*f*Mr*100/(m*v*106)式中：f為樣本的稀釋倍數，m為樣本質量Ag，v為上機時的進樣量。

3.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述檸檬酸和磺基水楊酸的混合液為2:1配置。

4.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述鹽酸采用5-6.5mol/L濃度。

5.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述自動分析儀的測定條件為層析柱216mmX 150mm，離子交換樹脂日立2619型；緩沖液流速20ml/h，泵壓S210035-37.0bar，柱溫50、60和70℃，分析時間40min。

6.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述檸檬酸鈉緩沖液的PH為2.2，配置方式為稱取19.6g檸檬酸鈉(Na3C6H507.2H20)和16.5ml濃鹽酸加水稀釋到1000ml，用濃鹽酸或50％的氫氧化鈉溶液調節pH至2.2。

7.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，還包括以下重現方法：

取制備好的樣品溶液，按照選定的色譜條件，進樣50ul，連續進樣4次，根據測定的結果，計算其標準差和變異系數，以4次結果的平均值作為氨基酸的含量。

8.根據權利要求1所述的一種基于氨基酸含量的蔬果營養功能功效的檢測方法，其特征在于，所述氨基酸包括賴氨酸、精氨酸、色氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、組氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、苯丙氨酸、天冬氨酸和胱氨酸。