[發(fā)明專利]一種血清1型馬立克病病毒MEQ單克隆抗體、制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202210261765.5
• 申請(qǐng)日: 2022-03-16
• 公開（公告）號(hào): CN114480297B
• 公開（公告）日: 2023-03-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 羅俊;滕蔓;劉金玲;張改平;羅琴;鄭鹿平;邢廣旭;盧清俠;趙東;柴書軍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): C12N5/20
• 分類號(hào): C12N5/20;C07K16/08;G01N33/569;G01N33/574;G01N33/577;G01N33/68;C12N15/85;C12N15/89
• 代理公司: 鄭州市華翔專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41122
• 代理人: 張愛軍

本發(fā)明公開了一種抗血清1型馬立克病病毒MEQ蛋白單克隆抗體、制備方法及應(yīng)用。所述抗MDV?1特異性MEQ蛋白單克隆抗體由鼠源單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株meq?2A9?B12產(chǎn)生，該細(xì)胞株已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)：CGMCC No:23023，該單克隆抗體亞型為IgG2b，輕鏈型為Kappa，其重鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本發(fā)明分泌的單克隆抗體2A9?B12可用于MDV?1不同致病型毒株的IFA和Western blot等免疫學(xué)檢測(cè)分析，還可以鑒別區(qū)分MDV?2和MDV?3毒株，適用于臨床疑似病例中不同血清型MDV流行毒株的鑒別診斷。本發(fā)明解決了目前國內(nèi)缺乏抗MDV?1 MEQ蛋白特異性單抗的“卡脖子”問題，為MD后續(xù)研究及診斷試劑研發(fā)提供了關(guān)鍵核心試劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種血清1型馬立克病病毒MEQ單克隆抗體、制備方法及應(yīng)用，屬于動(dòng)物免疫學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

雞馬立克病(Marek’s disease，MD)是由馬立克病病毒(Marek’s disease virus，MDV) 早期感染雛雞引發(fā)的一種重要的免疫抑制病及腫瘤病。MDV早期感染宿主后產(chǎn)生嚴(yán)重的免疫抑制，是臨床禽病疫苗免疫預(yù)防效果不佳的重要因素之一，長(zhǎng)期以來一直困擾著我國養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展。同時(shí)，MDV感染自然宿主后會(huì)誘發(fā)內(nèi)臟腫瘤和大批死亡，導(dǎo)致全球養(yǎng)禽業(yè)年均直接經(jīng)濟(jì)損失約10-20億美元。MDV誘發(fā)宿主腫瘤的發(fā)生可以用疫苗進(jìn)行有效的免疫預(yù)防，是世界上首個(gè)可以用疫苗成功預(yù)防致瘤性病毒引發(fā)癌癥的例子，但是近年來隨著MD疫苗在雞群中的廣泛應(yīng)用，在長(zhǎng)期的免疫壓力選擇下，MDV流行毒株的毒力正不斷增強(qiáng)和變異，MD 疫情在全球范圍內(nèi)仍不斷暴發(fā)。

MDV共有3種不同的血清型：血清1型(MDV-1)、血清2型(MDV-2)和血清3型(MDV-3，即火雞皰疹病毒HVT)，其中只有MDV-1具有致病性和致瘤性。根據(jù)致病性的不同，MDV-1 流行毒株又可分為溫和毒(Mild MDV，mMDV)、強(qiáng)毒(Virulent MDV，vMDV)、超強(qiáng)毒(Veryvirulent MDV，vvMDV)以及特超強(qiáng)毒(Very virulent plus MDV，vv+MDV)。

MDV病毒基因組為線性雙股DNA，全長(zhǎng)約180kb。主要由一個(gè)長(zhǎng)獨(dú)特序列區(qū)(Uniquelong，UL)和一個(gè)短獨(dú)特序列區(qū)(Unique short，US)構(gòu)成，在兩個(gè)獨(dú)特序列區(qū)兩側(cè)分別是兩個(gè)序列完全相同的反轉(zhuǎn)重復(fù)序列區(qū)：長(zhǎng)末端重復(fù)序列(Terminal repeat long，TRL)和長(zhǎng)內(nèi)部重復(fù)序列(Internal repeat long，IRL)以及短末端重復(fù)序列(Terminal repeat short，TRS)和短內(nèi)部重復(fù)序列(Terminal repeat short，IRS)，獨(dú)特序列區(qū)中編碼的病毒基因與其它皰疹病毒具有高度保守性，而MDV特異性的病毒基因則主要位于反轉(zhuǎn)重復(fù)序列區(qū) TR/IR中。