[發明專利]一種通用型適體生物傳感器及在標志物檢測領域的應用

在審

• 申請號: 202210198403.6
• 申請日: 2022-03-01
• 公開（公告）號: CN114561446A
• 公開（公告）日: 2022-05-31
• 發明（設計）人: 姜瑋;張楠;丁勝勇
• 申請（專利權）人: 山東大學
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806;C12Q1/682;C12Q1/6886;C12N15/115;G01N33/574;G01N33/543;G01N33/58
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 李箏

本發明涉及一種通用型適體生物傳感器及在標志物檢測領域的應用?，F有生物傳感通常需要針對目標物設計整個傳感器的識別單元，顯著的限制了傳感器應用的靈活性。本發明目的在于提供一種通用型的生物傳感器，通過替換其中的識別元件即可實現靈敏檢測。為了實現上述目的，本發明提供的通用型適體生物傳感器，包括磁性探針模塊和信號放大模塊，其中，磁性探針模塊為修飾識別探針的磁珠，所述識別探針中具有檢測目標的適體序列；所述信號放大模塊包括具孔載體，所述具孔載體包載熒光染料，表面修飾連接鏈，所述連接鏈中包括識別探針的反義序列，或包括適體序列。經驗證，上述傳感器可應用于多種腫瘤標志物的檢測，具有良好的檢測靈敏度。

技術領域

本發明屬于標志物檢測生物傳感器技術領域，具體涉及一種通用型適體生物傳感器、所 述通用型適體生物傳感器在標志物檢測領域的應用及一種標志物的檢測方法。

背景技術

公開該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不必然被視為 承認或以任何形式暗示該信息構成已經成為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

作為生命活動的物質基礎，生物體內生物分子的穩態在細胞增殖、分化和凋亡等多種細 胞過程中發揮著不可或缺的作用。其中，某些生物分子的異常表達會導致癌癥的發生與發展， 這些生物分子被稱為癌癥標志物。例如，三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate,ATP)，作為 細胞活動的基本能量分子，在癌細胞微環境中表達水平顯著高于正常細胞；凝血酶，一種催 化纖維蛋白原轉化為纖維蛋白的蛋白酶，在白血病細胞中表達水平升高；血小板衍生生長因 子-BB(Platelet-derived growth factor BB,PDGF-BB)，一種重要的細胞因子，在多種癌細胞 中過表達。癌癥標志物表達異常的出現往往早于癌癥的臨床癥狀，目前它們的表達水平已經 成為癌癥早期診斷的重要依據。值得注意的是，多數癌癥標志物僅微量表達，且在癌癥早期 階段的異常變化極其微弱。因此，開發能夠區分癌癥標志物微弱變化的靈敏檢測方法對于癌 癥的及早發現和深入研究具有重要意義。

熒光傳感器由于信號響應強，在癌癥標志物的靈敏檢測中備受關注。尤其是一些熒光傳 感器，通過與核酸擴增策略相結合，在癌癥標志物檢測中顯示出更高的靈敏度。目前，大多 數熒光傳感器是利用蛋白酶輔助的DNA合成/水解或無酶DNA組裝獲得放大的信號。然而， 蛋白酶的非特異性作用和DNA組裝中不可避免的泄漏會導致假性信號，在一定程度上降低 檢測的準確度。此外，在大多數已報道的熒光傳感器中，識別單元的序列往往參與信號放大 過程，因此必須針對每個特定目標物設計整個傳感器，這限制了傳感器檢測的靈活性。因此， 為了解決上述問題，有必要開發一種具有新型放大模式的通用型傳感器用于多種目標物的靈 敏檢測。

發明內容

為了實現微量標志物的靈敏檢測，本發明設計將磁分離與集束式熒光放大相結合，設計 了一種模塊化通用型適體傳感器，該傳感器是一種通用型檢測平臺，只需要根據檢測目標設 計識別探針，可實現“即插即用”，應用更加廣泛。