[發明專利]一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法

在審

• 申請號: 202210178460.8
• 申請日: 2022-02-25
• 公開（公告）號: CN114533893A
• 公開（公告）日: 2022-05-27
• 發明（設計）人: 于士柱;華丹;王虔;周雪霞;石翠娟;孫翠云;羅文君;蔣振東
• 申請（專利權）人: 天津醫科大學總醫院
• 主分類號: A61K47/64
• 分類號: A61K47/64;A61K31/337;A61P35/00
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標代理有限公司 12103
• 代理人: 董光仁

1.一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

(1)合成與樹脂結合的多肽；(2)化合物Ⅰ與二元酸在有機堿催化劑的催化下得到化合物Ⅱ；(3)化合物Ⅱ和步驟(1)所得的多肽在有機堿催化劑的催化下得到化合物Ⅲ；其中，有機堿催化劑包括羥基活化試劑、縮合劑；

化合物Ⅰ

化合物Ⅱ

化合物Ⅲ

所述多肽序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)的具體步驟如下：

1)先將化合物Ⅰ以1mmol：15ml的比例溶于二氯甲烷中，再向其中投入羥基活化試劑，混勻后，在氮氣的保護下于室溫下攪拌反應；

2)待步驟1)反應結束后，維持氮氣保護和攪拌，向反應液內加入縮合劑反應；

3)待步驟2)反應結束后，向反應液中加入二元酸，室溫反應并用薄層色譜法跟蹤反應進程；

4)待步驟3)反應結束后，將得到的產物慢慢傾入水中，用有機相進行萃取并進行清洗、干燥和濃縮，最終得到固體產物；

5)將步驟4)中得到的固體產物用乙腈/水溶液溶解后，使用制備型HPLC進行純化；

6)去除步驟5)得到的產物中的有機溶劑，使用凍干機凍干成白色粉末，得到純化后的化合物Ⅱ。

3.根據權利要求1所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)的具體步驟如下：

1)先將化合物Ⅱ以1mmol：10ml的比例溶于DMF中，再向其中投入羥基活化試劑，混勻后，在氮氣的保護下于室溫下攪拌反應；

2)待步驟1)的反應結束后，在氮氣保護條件下，邊攪拌邊加入縮合劑反應；

3)待步驟2)的反應結束后，再向反應液中加入步驟(1)所得的多肽，室溫反應，薄層色譜法跟蹤反應進程；

4)待步驟3)結束后，將步驟3)中所得的產物中的樹脂切割下來，過濾后得到含有產物的濾液，使濾液中的產物沉淀并進行清洗產物后，凍干產物獲得粗品；

5)將步驟4)得到的粗品用乙腈/水溶液溶解后，使用制備型HPLC進行純化；

6)去除步驟5)所得產物中的有機溶劑，使用凍干機凍干成白色粉末，即得純化后的化合物Ⅲ。

4.根據權利要求1-3中任意之一所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：所述有機堿催化劑為N,N′-二異丙基碳二亞胺、4-二甲氨基吡啶、1,8-二氮雜二環[5.4.0]十一碳-7-烯、二異丙基乙基胺、嗎啉、N-甲基嗎啉、咪唑、吡啶或三乙胺中的任意一種或多種。

5.根據權利要求1-3中任意之一所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：所述二元酸為乙二酸、丙二酸或丁二酸戊二酸中的任意一種或多種。

6.根據權利要求1-3中任意之一所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法：步驟(2)中，所述化合物Ⅰ、二元酸以及縮合劑的用量的摩爾比為1：1.2：1.2N，所述N代表縮合劑的種類，當N＞1時，每一種縮合劑的用量相等。

7.根據權利要求1-3中任意之一所述的一種具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇的制備方法，其特征在于：步驟(3)中，所述化合物Ⅱ、多肽及縮合劑的用量的摩爾比為1.5：2：3。

8.一種權利要求1中制備方法制得的具有抗膠質瘤活性的與多肽偶聯的紫杉醇，其特征在于：所述與多肽偶聯的紫杉醇的PBS溶液的濃度為3mg/ml時，所述與多肽偶聯的紫杉醇呈球狀納米結構。

9.根據權利要求8中所述的與多肽偶聯的紫杉醇，其特征在于：所述球狀納米結構微粒直徑為150nm-180nm。

10.一種權利要求1中制備方法制得的與多肽偶聯的紫杉醇在制備抑制膠質瘤生長的藥物中的用途，其特征在于：所述與多肽偶聯的紫杉醇分散于PBS溶液中時呈球狀納米結構，所述與多肽偶聯的PBS溶液的濃度為3mg/ml。