[發明專利]一種玻色因檢測方法及應用

有效

• 申請號: 202210176354.6
• 申請日: 2022-02-24
• 公開（公告）號: CN114487085B
• 公開（公告）日: 2023-06-27
• 發明（設計）人: 金佳薏;宋合興;周曉光;李運濤
• 申請（專利權）人: 生物島實驗室;廣東默迪優譜生物科技有限公司
• 主分類號: G01N27/64
• 分類號: G01N27/64;G01N1/28;G01N1/38
• 代理公司: 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758
• 代理人: 楊金賢;景鵬

本發明屬于分析檢測技術領域，具體公開了一種波色因檢測方法，同時還公開了波色因檢測方法的應用。本發明針對玻色因小分子的檢測，進行了樣本處理方式和檢測手段上的優化，通過納米基質前處理共結晶和MALDI?TOF?MS檢測手段，實現了對玻色因小分子的高效檢測。本發明方法不僅可以避免大量的樣本消耗，且同樣本可進行多次的重復檢測；檢測得到的分子質譜結果更是可直接給出明確的玻色因出峰信息，其單一峰形亦可以明確判斷樣本本身的純度。

技術領域

本發明涉及分析檢測技術領域，特別是涉及一種波色因檢測方法，同時還涉及該檢測方法的應用。

背景技術

玻色因(Pro-Xylane)是一種具有抗衰老活性物的木糖衍生物，結構式如下，可以促進膠原蛋白的合成，使肌膚更強韌有彈性，改善頸部細紋，預防衰老。玻色因最初由歐萊雅公司于2006年研發成功，現已應用于多種護膚產品的研發和生產中。

針對玻色因分子的檢測，目前普遍使用的是電噴霧質譜ESI，如ESI-API(大氣壓電離質譜)，ESI-API適合分析中等極性和弱極性的小分子有機化合物，樣本需要處于液體狀態進行軟電離。一方面，作為昂貴的合成分子，玻色因的樣本價格及可用于檢測的樣本消耗都是有限的；其次，在檢測靈敏度和純度判讀上，ESI-API給出的結果是復雜的多峰譜圖，玻色因在ESI-API正離子模式下檢測到的出峰結果見附圖1所示，可以看出其結果在出峰上存在明顯的復雜性，是復雜的多峰譜圖。根據這種出峰譜圖，無法精確定位單獨的分子出峰，且無法根據譜圖確定樣本純度。

因此，為解決珍貴樣本的大量消耗問題，以及能快速且高效地得到有機合成分子更明確干凈的分子信息，有必要提供一種波色因的檢測方法。

發明內容

本發明主要解決的技術問題是提供一種波色因的檢測方法，本發明方法不僅可以避免大量的樣本消耗，而且檢測得到的質譜結果具有明確的玻色因出峰信息。

為解決上述技術問題，本發明提供了一種玻色因檢測方法，所述檢測方法包括樣品處理步驟，所述樣品處理步驟是將含玻色因樣本與基質混合，所述基質采用二氧化鈦。

優選地，所述基質為納米二氧化鈦，進一步優選為二氧化鈦P25。

作為本發明一種優選的實施方案，所述基質先分散在溶劑中，制成含基質的混合液，之后再與所述含玻色因樣本混合；優選所述含基質的混合液中基質的濃度為10±2mg/mL。

優選地，基質分散用所述溶劑為乙醇和氯化鈉水溶液的混合溶劑，進一步優選乙醇和氯化鈉水溶液的混合體積比為(1～2)：(1～2)，更優選以體積比1：1混合。

進一步優選地，所述乙醇為無水乙醇。更優選地，所述無水乙醇的質量百分比濃度99％。

所述氯化鈉水溶液的質量百分比濃度為0.8～0.9％，更優選為0.85％。

作為本發明一種優選的實施方案，所述含玻色因樣本中玻色因樣本為玻色因水合物。

玻色因水合物中波色因可以以任意比例與水進行水合。作為一種具體的實施方案，玻色因水合物中水的質量百分比含量為25～35％。進一步地，作為一種更具體的實施方案，選擇的玻色因水合物中水的質量百分比含量為30％。

優選地，所述含玻色因樣本通過對玻色因樣本稀釋獲得，稀釋用溶劑為三氟乙酸水溶液。

進一步優選地，所述三氟乙酸水溶液的質量百分比濃度為0.05～0.15％，進一步優選質量百分比濃度為0.1％。

優選地，稀釋倍數為50～1000倍。

所述樣品處理步驟包括：將所述含玻色因樣本與所述含基質的混合液混合，混合的體積比為1：(1～2)，優選為1：1.5。