[發明專利]一種高靈敏檢測真菌毒素玉米赤霉烯酮的生物傳感器

有效

• 申請號: 202210122803.9
• 申請日: 2022-02-09
• 公開（公告）號: CN114606304B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發明（設計）人: 陳俊華;潘家峰;鄧芳
• 申請（專利權）人: 廣東省科學院生態環境與土壤研究所
• 主分類號: C12Q1/6876
• 分類號: C12Q1/6876;C12Q1/6806;C12N15/115;G01N21/64
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 齊鍵

1.一種玉米赤霉烯酮檢測試劑，其特征在于，所述試劑中含有發夾探針組，所述發夾探針組由發夾探針A、發夾探針B和發夾探針C組成；

所述發夾探針A～C的核苷酸序列分別為：

發夾探針A：5'-TCATCTATCTATGGTACATTACTATCTGTAATGTGATATGGCTCCCTTTACGCCACCCACACGATAG-3'；

發夾探針B：5'-GGGGTGTGGGTGGCGTAAAGGGAGCCCATGTATCGAGCTCCCTTTACGCCTGTGT-3'；

發夾探針C：5'-TGTGTGTGTGTAAGGGAGCTCGATACATGGGCTCCCTTTACGCCCCATGTATCGA-3'。

2.一種玉米赤霉烯酮檢測試劑盒，其特征在于，所述玉米赤霉烯酮檢測試劑盒中含有權利要求1所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑、酶鏈和底物鏈。

3.根據權利要求2所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑盒，其特征在于，所述酶鏈的核苷酸序列為：

酶鏈DNA1：5'-?ACACAGGCGTAGACTCCGAGCCGGACGAAGTTACCCACACCCC-3'。

4.根據權利要求2所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑盒，其特征在于，所述底物鏈的核苷酸序列為：

底物鏈DNA2：5'-TCGATACATGGAACTrAGGTCACACACACACA-3'；

其中，rA代表核酸A修飾。

5.根據權利要求4所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑盒，其特征在于，所述底物鏈上修飾有熒光基團和淬滅基團，所述熒光基團和淬滅基團分別修飾于酶切位點的對立兩側。

6.根據權利要求1所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑或權利要求2~5任一項所述的玉米赤霉烯酮檢測試劑盒在食品安全檢測中的應用。

7.一種非診斷目的的玉米赤霉烯酮的定性和/或定量檢測方法，包括如下步驟：

（1）將權利要求1中的發夾探針A～C加熱至92~95℃，然后冷卻至室溫，使其形成發夾結構；

（2）將檢測樣品、形成發夾結構的發夾探針A～C、權利要求3中的酶鏈DNA1和權利要求4中的底物鏈DNA2在25±2℃條件下孵育90~95?min，檢測熒光信號。

8.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測樣品為食品。

9.根據權利要求7所述的檢測方法，其特征在于，所述檢測方法的檢測體系為：

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