[發明專利]抑制或沉默DUSP4基因表達的物質和檢測DUSP4蛋白含量或基因表達的物質的應用

在審

• 申請號: 202210109838.9
• 申請日: 2022-01-28
• 公開（公告）號: CN114480685A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 吳雪瓊;梁艷;米潔;薛勇;劉銀萍;張俊仙;王蘭;王杰
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍總醫院第八醫學中心
• 主分類號: C12Q1/689
• 分類號: C12Q1/689;C12Q1/6883;C12Q1/02;A61K45/00;A61K49/00;A61P31/06;G16B35/20
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 張羽

本發明公開了抑制或沉默DUSP4基因表達的物質和檢測DUSP4蛋白含量或基因表達的物質的應用。抑制或沉默DUSP4基因表達的物質的應用為在制備預防和/或治療結核病的產品中的應用。

技術領域

本發明屬于生物技術領域。具體地說，本發明涉及抑制或沉默DUSP4基因表達的物質和檢測DUSP4蛋白含量或基因表達的物質的應用。

背景技術

我國的結核病疫情和結核菌感染情況都相當嚴重，是全球30個結核病高負擔國家之一，結核病人數位居世界第二，僅次于印度。根據2021年全球結核病報告表明，2020年我國新發結核病例84.2萬，結核病死亡人數約3萬，在傳染病中居第一位。我國約20％左右人口感染了結核菌，其中5％可能早期發病，5-10％在其一生中的任何時候可能發病。結核潛伏感染具有發展為活動性結核病的風險，研究顯示85％-90％新診斷的活動性肺結核是由結核潛伏感染(1atent tuberculosis infection，LTBI)發展而來，由此可見，結核潛伏感染者成為結核病患者的重要來源。因此，結核病的早期診斷和鑒別診斷對結核病疫情的控制具有極其重要的意義。

目前約30-50％的結核病患者不排菌或排菌量很少，通過細菌學或分子生物學的方法無法確診，如痰涂片顯微鏡檢查和分枝桿菌培養的陽性率約30％左右，結核菌核酸檢測的陽性率約50-70％，需通過免疫學方法檢測宿主的免疫應答來輔助診斷菌陰結核病。目前在臨床常用的免疫學輔助診斷方法主要有結核菌素皮膚試驗(TST)、γ干擾素釋放試驗(IGRAs)和結核抗體檢測，TST和IGRAs可診斷結核菌感染，不能鑒別是結核菌潛伏感染還是活動性結核病，而且TST不受卡介苗接種的影響；而結核抗體檢測的靈敏度和特異性較差，世界衛生組織不推薦用于結核病的診斷。因此，研發新的有效的菌陰結核病診斷和鑒別診斷方法及早期療效判斷指標是非常有益的。

雙特異性磷酸酶4(DUSP4)基因編碼的蛋白(MKP-2)是雙特異性蛋白磷酸酶亞家族的一員，這些磷酸酶通過磷酸絲氨酸/蘇氨酸和磷酸酪氨酸殘基的去磷酸化使其靶激酶失活，它們對與細胞增殖和分化相關的絲裂原活化蛋白(MAP)激酶超家族(MAPK/ERK、SAPK/JNK、p38)成員進行負性調節。DUSP4通過磷酸絲氨酸/蘇氨酸和磷酸酪氨酸殘基的去磷酸化使MAP激酶失活，抑制抗菌效應分子的表達，從而調節免疫反應，是炎癥反應的重要負性調節因子。但DUSP4優先使ERK和JNK去磷酸化，不影響p38 MAP激酶；其中ERK途徑與Th2分化有關；Th1細胞產生的細胞因子依賴于JNK活性；p38激活有利于Th1。DUSP4已證明在細胞凋亡、氧化應激反應和衰老中發揮作用，在先天性和適應性免疫細胞反應中發揮重要作用。DUSP4是一把雙刃劍，可以防止T細胞過度激活，也抑制TCR反應，這限制了T細胞對抗原的反應，可能會損害T細胞依賴性B細胞反應，而使CD4⁺T細胞功能低下，適應性免疫反應缺陷。細胞免疫應答在抗結核免疫中發揮重要的作用，而其中CD4⁺T細胞是抗結核的主力軍。Subuddhi A等(Subuddhi A，Kumar M，Majumder D，et al.Unraveling the role of H3K4trimethylation and lncRNA HOTAIR in SATB1 and DUSP4-dependent survival ofvirulent Mycobacterium tuberculosis in macrophages.Tuberculosis(Edinb).2020Jan；120：101897.)的研究發現，DUSP4在感染結核分枝桿菌強毒株H₃₇Rv的巨噬細胞中的表達水平明顯高于感染弱毒株H₃₇Ra的巨噬細胞；DUSP4基因敲除會降低THP-1巨噬細胞中H₃₇Rv的存活率，但不會降低H₃₇Ra的存活率。

發明內容

本發明的目的之一是在于提供抑制或沉默DUSP4基因表達的物質以及檢測DUSP4蛋白含量或基因表達的物質的應用。

本發明提供了抑制或沉默DUSP4基因表達的物質在制備預防和/或治療結核病的產品中的應用。