[發明專利]一株抗芬氟拉明單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用有效
| 申請號: | 202210105671.9 | 申請日: | 2022-01-27 |
| 公開(公告)號: | CN114409796B | 公開(公告)日: | 2023-08-11 |
| 發明(設計)人: | 劉麗強;嚴婕妤;胥傳來;匡華;徐麗廣;孫茂忠;吳曉玲;馬偉;郝昌龍;宋珊珊;吳愛紅;郭玲玲;胥欣欣;倪萍;畢雪威;郭鵬飛 | 申請(專利權)人: | 無錫迪騰敏生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07K16/44 | 分類號: | C07K16/44;C12N5/20;G01N33/53;G01N33/577;G01N33/558 |
| 代理公司: | 無錫承果知識產權代理有限公司 32373 | 代理人: | 劉清麗 |
| 地址: | 214000 江蘇省無錫市濱*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一株抗芬氟拉明 單克隆抗體 雜交瘤 細胞株 及其 應用 | ||
本發明公開了食品安全免疫檢測領域的一株抗芬氟拉明單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用。該雜交瘤細胞株的保藏編號為CGMCC?NO.45025,其分泌產生的抗芬氟拉明單克隆抗體對芬氟拉明有較好的檢測靈敏度和親和力,可用來建立芬氟拉明酶聯免疫檢測方法或建立膠體金免疫層析試紙條快速檢測方法,為間接競爭ELISA試劑盒以及膠體金試紙條的研發推廣奠定了基礎。
技術領域
本發明屬于食品安全免疫檢測領域,具體涉及一株抗芬氟拉明單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用。
背景技術
芬氟拉明是一種苯丙胺類食欲抑制藥,外觀為純白結晶體,晶瑩剔透,具有較弱的興奮中樞的作用,可使血壓下降;亦能加強周圍組織對葡萄糖的利用而降低血糖;還有降低膽固醇、三酰甘油及血漿總脂質的作用。臨床上用于單純性肥胖及伴有糖尿病、高血壓、焦慮癥和心血管疾病的肥胖。芬氟拉明也被稱為冰毒,對人體的中樞神經系統具有極強的刺激作用,且毒性較強,能使人體產生強烈的生理興奮,能消耗大量的體力和降低免疫功能,嚴重損害心臟、大腦組織甚至導致死亡。隨著人們的審美觀念的改變和愛美之心,減肥藥的需求量和使用量急劇增大,也使含有芬氟拉明的減肥藥的使用趨勢上升,引發了很多的健康和社會問題,因此,迫切需要設計一種準確度高、可操作性強的檢測分析保健食品中芬氟拉明含量的方法。
芬氟拉明的常規檢測方法包括分光光度法,薄層色譜法,氣相色譜法,液相色譜法和核磁共振法等。這些方法在不同程度上存在一些缺陷:耗時,昂貴的儀器和大量的樣品預處理程序等。因此,這些方法不適合現場進行高通量分析地芬氟拉明的檢測。因為需要分析系統,這意味著這些方法在現場分析中的應用受到限制。
而免疫分析方法具有低成本、高通量、高靈敏、對技術人員相對要求低等特點,因此適用于大量樣品的快速篩查。而使用免疫分析方法法檢測芬氟拉明的前提是得到對芬氟拉明具有高特異性和高靈敏度的單克隆抗體,因此,找到一種制備對芬氟拉明具有高特異性和高靈敏度的單克隆抗體的方法十分關鍵。
發明內容
為了解決現有技術中的不足,本發明的目的在于提供一株抗芬氟拉明單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用。
本發明第一方面提供一株抗芬氟拉明單克隆抗體的雜交瘤細胞株CGM,其保藏編號為CGMCC?NO.45025。
本發明第二方面提供一種抗芬氟拉明單克隆抗體,由所述的雜交瘤細胞株CGM分泌產生。
本發明第三方面提供所述雜交瘤細胞株CGM或由所述雜交瘤細胞株CGM分泌產生的抗芬氟拉明單克隆抗體在芬氟拉明檢測中的應用、在制備芬氟拉明免疫檢測試劑盒中的應用或在制備芬氟拉明檢測膠體金試紙條中的應用。
本發明第四方面提供一種芬氟拉明免疫檢測試劑盒,其包含所述雜交瘤細胞株CGM或由所述雜交瘤細胞株CGM分泌產生的抗芬氟拉明單克隆抗體。
進一步地,所述芬氟拉明免疫檢測試劑盒還包含酶標板、芬氟拉明包被抗原、芬氟拉明標準液、酶標記二抗和底物反應液;
優選地,所述芬氟拉明包被抗原分子結構式如下式所示,
本發明第五方面提供一種芬氟拉明檢測膠體金試紙條,其包括樣品墊、膠體金結合墊、硝酸纖維素膜和吸水墊,所述硝酸纖維素膜上依次設有檢測線和質控線,所述膠體金結合墊上包被由所述雜交瘤細胞株CGM分泌產生的抗芬氟拉明單克隆抗體。
進一步地,所述檢測線由芬氟拉明包被抗原印制得到。
優選地,所述芬氟拉明包被抗原分子結構式如下式所示,
本發明第六方面提供所述芬氟拉明免疫檢測試劑盒或所述芬氟拉明檢測膠體金試紙條在芬氟拉明檢測中的應用。
本發明雜交瘤細胞株CGM細胞株的制備基本步驟為:
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