[發明專利]一種檢測雌二醇含量的檢測卡、制備方法、試劑盒及檢測方法

在審

• 申請號: 202210100778.4
• 申請日: 2022-01-27
• 公開（公告）號: CN116559470A
• 公開（公告）日: 2023-08-08
• 發明（設計）人: 劉雙;蔣析文;齊文闖;潘秀華;陳澤壯
• 申請（專利權）人: 廣州達安基因股份有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/558;G01N33/543;G01N21/64
• 代理公司: 深圳市世聯合知識產權代理有限公司 44385
• 代理人: 姜妍

本發明公開了一種定量檢測雌二醇含量的檢測卡、其制備方法、試劑盒及檢測方法；其中，試劑盒所包括的檢測卡中包括有PVC底板、樣品墊、結合墊、反應板膜及吸水墊，所述PVC底板為長條狀構造，所述樣品墊、結合墊、硝酸纖維素膜及吸收墊沿所述PVC底板長度方向依次排布設置在PVC底板的一個表面，且反應板的兩端分別與結合墊及吸收墊的一端層疊搭接，結合墊的另一端與樣品墊的一端層疊搭接。該試劑盒檢測靈敏度更高、檢測范圍更寬、價格低廉，且具有快速、操作簡便的特點，應用前景廣。

技術領域

本發明涉及基于免疫學和層析技術原理的生物醫學檢測領域，尤其涉及一種檢測雌二醇含量的檢測卡、制備方法、試劑盒及檢測方法。

背景技術

雌二醇是一種C18類固醇激素，是雌激素中生物活性最高的激素含量最多，由男性睪丸、女性卵巢和妊娠胎盤產生或由雌激素轉化而來，其水平隨月經周期而變化。雌二醇的主要生理功能是促進卵細胞的生成和發育，促進卵巢和女性性器官的發育，促進女性第二性征的出現，還可促進肝臟合成多種運輸蛋白。血雌二醇濃度是檢查下丘腦-垂體-生殖靶腺軸功能指標之一，對診斷早熟、發育不良等內分泌疾病及婦科疾病有一定的診斷意義。從妊婦尿、人胎盤、豬卵巢等中獲得。雄馬的精巢或尿中也存在雌二醇。

雌二醇的主要生理功能是促進卵細胞的生成和發育，對診斷早熟、發育不良等內分泌疾病扮演著重要的角色，是應用于卵巢疾病診斷篩查的一個重要手段。目前主要有化學和免疫兩大類方法用來檢測雌二醇，各種檢測方法都具有自己的優劣勢，具體如下。

1常見的化學檢測方法

1)氣相色譜法是色譜法的一種，其原理是利用載氣載著待分離的樣品通過色譜柱中的固定相，根據不同物質在氣、固兩相中具有不同的分配系數，當兩相相對運動時，樣品中各組分就在兩相中進行反復多次的分配，從而實現不同組分彼此分開；再配以電子捕獲檢測器、氫火焰離子檢測器、電化學儀、質譜儀等儀器來檢測。該法具有檢測效率高、選擇性好、靈敏度高、操作簡單、分析速度快、應用廣泛的分析分離方法。

2)高效液相色譜法(HPLC)用液體作為流動相的色譜法，其原理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據固定相的不同，液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。HPLC法檢測的分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復性好，定量精度高。但其要用適宜的填料柱，容量小，流動相消耗大且有毒性的居多。

3)氣相色譜-質譜GC-MS被廣泛應用于復雜組分的分離與鑒定，其具有GC的高分辨率和質譜的高靈敏度，是生物樣品中藥物與代謝物定性定量的有效工具。

4)液相色譜-質譜色譜質譜的在線聯用將色譜的分離能力與質譜的定性功能結合起來，實現對復雜混合物更準確的定量和定性分析。而且也簡化了樣品的前處理過程，使樣品分析更簡便。

5)毛細管電泳技術(CE)是20世紀80年代初期在電泳技術的基礎上發展起來的一種分離分析技術。它是以彈性石英毛細管為分離通道，以高壓直流電場為驅動力，依據樣品中各組分之間淌度和分配行為上的差異而實現分離的電泳分離分析方法。

2常見的免疫學方法

1)免疫膠體金方法(ICA)是將高電子密度的膠體金作為標記物標記在抗體或者抗原上，當其在相應的配體處發生聚集時會產生肉眼可見的顏色，因而可以用以定性或者半定量的檢測研究中。隨著膠體金研究的發展，在金核的表面可以進行一定的修飾，主要為含硫的配體、含磷化物、磷氧化物、氨基和羧基的配體。該方法靈敏度較低，不能進行定量的檢測達不到臨床診斷的要求。

2)放射免疫法(RIA)是利用同位素標記的與未標記的抗原，同抗體發生競爭性抑制反應的方法。該方法會有交叉反應、操作時長較長、儀器價格高、并且有一定的輻射對操作員有一定的損傷。

3)化學發光免疫分析法(CLIA)是將具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。該方法檢測精度不高，儀器設備的成本較高。