[發明專利]一種角蛋白BD-8、制法和其藥物組合物與用途

在審

• 申請號: 202210085317.4
• 申請日: 2022-01-25
• 公開（公告）號: CN116535485A
• 公開（公告）日: 2023-08-04
• 發明（設計）人: 庾石山;王曉良;王曉婧;符江;史國茹;屈晶;馮楠;蔡杰;張咪
• 申請（專利權）人: 中國醫學科學院藥物研究所
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;A61K38/17;A61P29/00;A61P11/10;A61P11/14;A61P9/12;A61P25/08;A61P31/12;C12R1/19
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1.一種角蛋白BD-8，其特征在于，所述角蛋白BD-8的氨基酸序列為：

(1)序列表中SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列；

(2)序列表中SEQ?ID?NO.1所示的氨基酸序列經替換、缺失或添加1-45個氨基酸形成的基本上保持相同生物學功能的氨基酸序列。

2.根據權利要求1的角蛋白BD-8，其特征在于，在角蛋白BD-8上可進行常規修飾；或者在角蛋白BD-8上還連接有用于檢測或純化的標簽；或角蛋白BD-8的同源蛋白。

3.根據權利要求2的角蛋白BD-8，其特征在于，所述的常規修飾包括乙酰化、酰胺化、環化、糖基化、磷酸化、烷基化、生物素化、熒光基團修飾、聚乙二醇PEG修飾、固定化修飾、硫酸化、氧化、甲基化、脫氨化、形成二硫鍵或二硫鍵斷裂；所述的標簽包括His6、GST、EGFP、MBP、Nus、HA、IgG、FLAG、c-Myc、Profinity?eXact。

4.一種編碼權利要求1-3任一項所述角蛋白BD-8的核酸分子。

5.根據權利要求4的核酸分子，其特征在于，所述的核酸分子的核苷酸序列為：

(1)序列表中SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列；

(2)基于SEQ?ID?NO.2所示的核苷酸序列進行序列優化得到的核苷酸序列；

(3)與上述(1)或(2)中的核苷酸序列互補的核苷酸序列。

6.一種表達載體，其特征在于，所述的表達載體含有權利要求4-5任一項所述的核酸分子。

7.一種宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞含有權利要求6所述的表達載體或者基因組中整合有權利要求4-5任一項所述的核酸分子。

8.根據權利要求7的宿主細胞，其特征在于，所述的宿主細胞包括細菌、酵母、曲霉菌、植物細胞、或昆蟲細胞。

9.根據權利要求8的宿主細胞，其特征在于，所述的細菌包括大腸桿菌。

10.一種制備生產權利要求1～3任一項所述角蛋白BD-8的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A.合成權利要求1～3任一項所述的角蛋白BD-8對應的核酸分子，將核酸分子連入相應的表達載體，將表達載體轉化到宿主細胞，在一定條件下在發酵設備中培養帶表達載體的宿主細胞并誘導表達角蛋白BD-8，得到含有角蛋白BD-8的粗蛋白溶液；

B.對步驟A中所表達的粗蛋白溶液進行分離純化干燥得到角蛋白BD-8。

11.根據權利要求10的方法，其特征在于，在步驟A中，所述的宿主細胞主要為選自大腸桿菌，所述的角蛋白BD-8在大腸桿菌包涵體中表達，所述的發酵設備包括搖瓶或發酵罐。

12.根據權利要求10的方法，其特征在于，在步驟A中，誘導表達角蛋白BD-8后，可用清洗劑清洗雜質，用溶液溶解得到粗蛋白溶液。

13.根據權利要求10的方法，其特征在于，在步驟B中，所述的分離純化的方法包括超濾微濾膜技術純化方法、柱色譜純化方法、鹽析方法、透析方法。

14.一種藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物含有權利要求1～3任一項所述的角蛋白BD-8及以及藥學上可接受的載體或賦形劑。

15.權利要求1～3任一項所述的角蛋白BD-8或權利要求4-5任一項所述的核酸分子或權利要求6所述的表達載體或權利要求7-9所述的宿主細胞或權利要求14所述的藥物組合物在制備解熱、鎮痛、鎮咳、祛痰、抗驚厥、抗癲癇、降血壓、抗炎、抗病毒藥物中的應用。