[發(fā)明專利]一種磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體及其應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210067168.9
• 申請日: 2022-01-20
• 公開（公告）號: CN114426959A
• 公開（公告）日: 2022-05-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 應(yīng)漢杰;繆榕新;溫慶仕;鄭誠;王駿之
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué);南京工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12N9/12
• 分類號: C12N9/12;C12N15/54;C12N15/70;C12N1/21;C12P19/30;C12P7/64;C12P13/00;C12R1/19
• 代理公司: 江蘇圣典律師事務(wù)所 32237
• 代理人: 肖明芳

1.一種磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M3，其特征在于，所述磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M3的氨基酸與權(quán)利要求2所述的磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M2相比，將第9位的絲氨酸突變?yōu)楣劝彼幔瑢⒌?6位的蘇氨酸突變?yōu)楣劝彼?，將?04位的賴氨酸突變?yōu)樘於彼幔瑢⒌?16位的異亮氨酸突變?yōu)樘於彼幔瑢⒌?20位的亮氨酸突變?yōu)樘於彼幔瑢⒌?29位的天冬酰胺突變?yōu)楣劝彼?，將?48位的丙氨酸突變?yōu)樘於彼?，將?65位的脯氨酸突變?yōu)樘於彼幔瑢⒌?10位的亮氨酸突變?yōu)樘於彼幔隽姿崮憠A胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M3的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。

2.一種磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M2，其特征在于，所述磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M2的氨基酸與權(quán)利要求1所述的磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M1相比，將第28位的賴氨酸突變?yōu)楣劝彼帷⒌?4位的氨基酸賴氨酸突變?yōu)樘於彼?，將?2位的賴氨酸突變?yōu)樘於彼幔瑢⒌?2位的脯氨酸突變?yōu)樘於彼?，將?15位的亮氨酸突變?yōu)樘於彼?，所述磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M2的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。

3.一種磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體M1，其特征在于，所述磷酸胞苷膽堿酰轉(zhuǎn)移酶突變體M1的氨基酸序列與NCBI 序列號NP_011718.1的磷酸胞苷膽堿酰轉(zhuǎn)移酶的序列相比，將第14位賴氨酸突變?yōu)楣劝彼帷⒌?5位賴氨酸突變?yōu)楣劝彼?、將?8位賴氨酸突變?yōu)樘於彼帷⒌?71位的亮氨酸突變?yōu)樘於彼?、將?09位的精氨酸突變?yōu)樘於彼?，所述磷酸胞苷膽堿酰轉(zhuǎn)移酶突變體M1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。

4.編碼權(quán)利要求1-3任一項所述的磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體的核苷酸序列。

5.一種表達載體，其特征在于，所述表達載體包含權(quán)利要求4所述的核苷酸序列中的任意一種。

6.一種宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞包含權(quán)利要求5所述的表達載體。

7.權(quán)利要求1-3任一項所述的磷酸膽堿胞苷酰轉(zhuǎn)移酶突變體在制備胞苷二磷酸膽堿上的應(yīng)用。