[發明專利]楊葉肖槿內生真菌發酵提取物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202210051293.0
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN114404460B
• 公開（公告）日: 2023-03-28
• 發明（設計）人: 劉亞月;薛欣怡;張翼;馮昀鎧;廖清楠;胡雪瓊
• 申請（專利權）人: 廣東海洋大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;A61K36/06;A61P39/06;C12P1/02;C12R1/80
• 代理公司: 廣州專理知識產權代理事務所(普通合伙) 44493
• 代理人: 張鳳

本發明公開了一種楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX?002發酵提取物以及其作為活性成分在制備清除DPPH自由基的藥物或保健品中的應用。本發明提供的楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX?002發酵提取物具有明顯的抗氧化活性，且可有效消除DPPH自由基，在制備新型抗氧化藥物/保健品方面具有廣泛的應用前景。

技術領域

本發明涉及醫藥技術領域，尤其涉及一種楊葉肖槿內生真菌發酵提取物及其制備方法與應用。

背景技術

隨著我國的經濟發展和人民生活水平的提高，人們的飲食結構、生活方式都發生了很大的改變，但各類疾病也隨之而來。研究表明大量疾病的發展都與氧化應激有關，如癌癥、心臟病、老年癡呆等。當細胞產生的自由基和抗氧化劑不平衡導致機體內過量的活性氧(reactive oxygen species,ROS)積聚就可能發生氧化應激。

目前抗氧化藥物主要分為直接抗氧化藥物和間接抗氧化藥物兩種。直接抗氧化藥物能夠以適當的濃度到達病變部位,并與機體產生的ROS迅速反應,起到直接抗氧化作用；間接抗氧化藥物則是通過激活細胞內抗氧化信號通路,誘導抗氧化蛋白的表達達到清除ROS的目的。然而現有的抗氧化藥物只能抑制ROS 的產生或清除ROS。

另一方面，楊葉肖槿是一種廣泛分布于亞歐非、大洋洲的紅樹植物，其是一種常見的民間藥用植物，具有廣泛的藥學用途。如楊葉肖槿的樹皮可用來治療痢疾、皮膚疾病；葉子可消炎消腫，果實分泌液可制備皮癬。目前關于楊葉肖槿的研究也多局限于研究其各部位的成分以及藥用機理，并未有對其內生真菌的相關研究。

發明內容

本發明所要解決的技術問題在于，提供一種具有藥用價值的楊葉肖槿內生真菌發酵提取物及其制備方法與應用。

具體的，本發明提供了楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002發酵提取物作為活性成分在制備清除DPPH自由基的藥物或保健品中的應用。發明人通過研究發現，楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002發酵提取物具有明顯的抗氧化作用，且可清除DPPH自由基，即其在制備新型抗氧化藥物/保健品方面具有廣泛的應用前景。該菌種已于2022年1月4日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，地址為廣東省廣州市，保藏號為GDMCC NO:62179。

具體的，該Penicillium sp.YX-002發酵提取物的制備方法包括以下步驟：

(1)將楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002接種至培養基中，發酵得到發酵產物；

具體的，步驟(1)包括：

(1.1)將楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002活化；

具體的，將楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002置于溫度為20～30℃、濕度為60～90％(RH)的培養箱中活化。

(1.2)將活化后的楊葉肖槿內生真菌Penicillium sp.YX-002接種至海水馬鈴薯培養基，培養得到孢子液；

具體的，海水馬鈴薯培養基的組成為：馬鈴薯汁100～800mL/L，葡萄糖 10～50g/L，蛋白胨0.5～10g/L，海鹽5～50g/L。接種前在0.5×10⁵～3×10⁵Pa下滅菌 10～40min。優選的，在本發明的一個實施例中，海水馬鈴薯培養基的組成為：馬鈴薯汁500mL/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，海鹽20g/L。

其中，馬鈴薯汁的制備方法為：馬鈴薯去皮，洗凈切塊，加入去離子水，加熱煮沸10～30min，過濾即得，每100g馬鈴薯煮100mL土豆汁。

具體的，接種量為10～20g菌落平板/400mL培養基。接種后在搖床培養3～4 天，得到孢子液。