[發(fā)明專利]一種長鏈非編碼RNA及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202210046462.1
• 申請日: 2022-01-17
• 公開（公告）號: CN115247176B
• 公開（公告）日: 2023-06-20
• 發(fā)明（設計）人: 張金平
• 申請（專利權）人: 鄭州大學第一附屬醫(yī)院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;C12Q1/6886
• 代理公司: 新鄉(xiāng)市挺立眾創(chuàng)知識產權代理事務所(普通合伙) 41192
• 代理人: 趙振

本發(fā)明公開了一種長鏈非編碼RNA在制備抑制肝癌增殖、轉移試劑中的應用。基于肝癌細胞與癌旁組織中存在差異表達的長鏈非編碼RNA分子，發(fā)現(xiàn)長鏈非編碼RNA為LINC00376存在差異表達。通過miＲBase預測出miＲ?488?3p可能為LINC00376的潛在靶基因，并通過熒光素酶實驗獲得的證實。通過進一步向肝癌細胞中轉化長鏈非編碼RNA?LINC00376和miＲ?488?3p，發(fā)現(xiàn)能夠促進肝癌細胞的增殖，而向肝癌細胞中轉化長鏈非編碼RNA?LINC00376的干擾分子和miＲ?488?3p的抑制劑，發(fā)現(xiàn)能夠抑制肝癌細胞的增殖。因此，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了一種新的能夠調控肝癌細胞增殖或轉移的組合物，為進一步治療肝癌并研究肝癌的發(fā)病機理提供新的證據(jù)。

技術領域

本發(fā)明涉及腫瘤細胞生物學領域，具體涉及一種長鏈非編碼RNA?LINC00376及其應用。

背景技術

肝癌是最常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤之一，因其早期診斷率低及晚期預后差等特性，導致肝癌相關死亡率居高不下。作為高發(fā)病率、高致死率的腫瘤之一，原發(fā)性肝癌需要及時并有效的治療方案。原發(fā)性肝癌主要包括肝細胞癌（HCC）、肝內膽管癌（ICC）和?HCC-ICC?混合型?3?種不同的病理學類型，其中肝細胞癌為肝癌中最常見的病理類型，被認為是肝癌患者死亡的主要原因。肝細胞癌（hepatocellular?carcinoma，HCC）是現(xiàn)今全世界最常見的惡性腫瘤之一，也是引起人類癌癥患者死亡的重大原因之一，而其中有一半以上都是發(fā)生在中國。雖然目前肝移植和肝切除術是?HCC?的最主要的兩大治療手段，但患者術后?5年生存率仍比較低，且復發(fā)率較高，遠期療效仍未得到明顯改善。由于HCC早期無癥狀或癥狀不典型，且進展迅速，大多數(shù)患者被確診時已處于癌癥晚期。由于對?HCC?發(fā)病機制的認識不完全，患者難以在早期得到有效的診斷和治療，因此，迫切的需要深入研究?HCC?發(fā)生發(fā)展的分子機制，尋求?HCC?早期診斷或精準治療的靶標。

雖然現(xiàn)在有著大量的腫瘤相關基因已經被發(fā)現(xiàn)，但其潛在的分子作用機制尚未得到完全闡明。非編碼?RNA（noncoding?RNA，ncRNA）已被證實在各種疾病，尤其是在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著至關重要的作用。NcRNA?是不編碼任何蛋白質的?RNA，按長度可分為兩類：長鏈非編碼?RNA（Long?noncoding?RNA，LncRNA）和短鏈非編碼?RNA（microRNA，miRNA）。LncRNA?是長度超過?200?個核苷酸的?ncRNA，并在基因組轉錄過程中廣泛存在。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA?可以直接靶向基因的?3’-UTR?端，抑制靶基因的轉錄。而?lncRNA?則可以通過“分子海綿”作用，結合更多的?miRNA，解除?miRNA?對其下游靶基因的抑制作用，從而促進靶基因發(fā)揮作用。近年來的研究發(fā)現(xiàn)?lncRNA?在HCC?中發(fā)揮著各種不同的生物學功能，因此被認為是?HCC?生物學過程中的新型調節(jié)因子，為?HCC?的診治提供了新的方向。

MiRNA?作為?ncRNA?其中的一個種類，目前也已得到了學者們的廣泛研究，并被證實在?HCC?的發(fā)生發(fā)展中也起著重要的作用。最近的研究顯示，lncRNA和?miRNA?之間存在著相互的調節(jié)關系。LncRNA?可作為競爭性內源?RNA（competing?endogenous?RNA，ceRNA）來調節(jié)?miRNA?的表達及其生物學功能，競爭性吸附?miRNA?并且調控其下游的靶基因表達。

到目前為止，許多致癌或者抑癌基因已被確認為HCC?相關的lncRNA?的靶點。例如，lncRNAs?可以通過作用于相關基因如HBx，AKT1，GSK3B?Cdc25A，E2F1，hnRNP?U、PCAF，GF、PCAF，DMR，ICR，IGF2?和p53?等抑制癌細胞的增殖和轉移。通過調節(jié)這些相關基因，lncRNAs?能夠有效的發(fā)揮調節(jié)HCC?腫瘤發(fā)生發(fā)展的作用。?然而，已知的靶基因的數(shù)量增長迅速，表明lncRNAs?的復雜調控網絡。一般來說，lncRNAs?可以通過各種機制包括調控表觀遺傳改變、結合并調控RNA、DNA?和蛋白質、調控遺傳變異等作用，影響細胞內幾乎所有的中心法則的行為，從轉錄到翻譯再到影響蛋白功能。