[發明專利]犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑

在審

• 申請號: 202210036111.2
• 申請日: 2022-01-13
• 公開（公告）號: CN114354561A
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 劉忠;劉青平;劉春麗;王金龍;唐妍
• 申請（專利權）人: 山東鑫諾生物工程有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/569;G01N33/533;G01N33/543
• 代理公司: 山東菩勤專利代理有限公司 37343
• 代理人: 邱克強

1.犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑，其特征在于：包括CPV/CCV二聯檢測試劑卡和樣本稀釋液；

所述CPV/CCV二聯檢測試劑卡包括試劑卡本體和試劑卡本體上依次設置的加樣孔、結合墊、NC膜，所述結合墊中含有熒光標記的熒光微球，所述結合墊與NC膜的一端相連接，所述NC膜中部設置有T線，所述NC膜的另一端設置有C線，所述加樣孔用于添加所述樣本稀釋液；

所述熒光微球包括偶聯犬冠狀病毒抗體的微球和偶聯犬細小病毒抗體的微球；

所述樣本稀釋液由以下原料組成：牛血清白蛋白1～2％、疊氮化鈉0.1～1％、聚多卡醇0.1～0.5％、檸檬酸三鈉0.2～0.55％、檸檬酸0.15～0.18％、硫氰酸胍0.1-1％、余量為純化水。

2.根據權利要求1所述的犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑，其特征在于：還包括移液器吸頭、棉簽，所述移液器吸頭用于將樣本稀釋液緩緩滴入于試劑卡本體的加樣孔中，所述棉簽用于樣本的采樣。

3.根據權利要求1所述的犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑，其特征在于：所述樣本稀釋液由以下原料組成：0.3g/mL牛血清白蛋白1-2％、0.1g/mL疊氮化鈉0.1-1％、0.2g/mL聚多卡醇0.1-0.5％、0.8g/mL檸檬酸三鈉0.2-0.55％、0.6g/mL檸檬酸0.15～0.18％、0.01～0.1g/mL硫氰酸胍0.1-1％、余量為純化水。

4.根據權利要求1所述的犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、采用雙抗體夾心法檢測犬類糞便中的犬細小/犬冠狀病毒濃度，將測試樣本加入到稀釋液中混勻，滴加到加樣孔內，抗原會隨著樣本稀釋液擴散到結合墊上，與熒光標記的抗體相結合，形成復合物；

步驟二、所述復合物會繼續隨著溶液擴散到NC膜的T線上，被固定在T線上的包被抗體所捕獲，結合形成雙抗體復合物，T線上捕獲的抗原越多，T線的熒光信號就越強，沒有被捕獲的熒光微球復合物將繼續沿著NC膜擴散到C線，被包被在C線上的抗體所捕獲，形成C線；

步驟三、利用熒光檢測儀，檢測層析完成后的試劑條，根據熒光的強度可得出樣本溶液中抗原的濃度。

5.根據權利要求1所述的犬冠狀病毒二聯熒光定量檢測試劑的使用方法，其特征在于：包括以下步驟：

步驟一、打開儀器開關，登錄測試系統；

步驟二、從試劑盒中取出1個試劑卡、1瓶稀釋液；

步驟三、室溫下使用棉簽在犬肛門內壁或從犬新鮮糞便處采樣，將取樣后的棉簽在稀釋液中充分攪拌，然后將棉簽在瓶內擠壓后丟棄；

步驟四、將鋁箔袋撕開，取出試劑卡，用移液器從瓶中取80μL混勻液體，緩緩滴入于試劑卡的加樣孔中；

步驟五、加樣完成后將試劑卡插入到儀器卡槽內即可，儀器孵化10分鐘后，自動檢測；

步驟六、測量完成后儀器會自動顯示測量濃度值和打印檢測結果。