[發明專利]一種香菇綠霉病強抗性菌株的培育方法及其應用

有效

• 申請號: 202210025717.6
• 申請日: 2022-01-11
• 公開（公告）號: CN114375763B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發明（設計）人: 邊銀丙;郭孟配;杜捷;肖揚;馬曉龍
• 申請（專利權）人: 華中農業大學;武漢市農業科學院
• 主分類號: A01G18/00
• 分類號: A01G18/00;A01G18/10
• 代理公司: 武漢臻誠專利代理事務所(普通合伙) 42233
• 代理人: 胡星馳

本發明公開了一種香菇綠霉病強抗性菌株的培育方法，包括以下步驟：獲取待選香菇菌種，進行至少一次誘導培養，每次誘導培養結束后進行抗性評價，篩選拮抗能力變化大于等于預設閾值的菌株，依據拮抗能力變化越大，菌株抗性越強的原則直至篩選出合適強抗性菌株；所述誘導培養為將上一代的香菇菌種單菌落接種于誘導培養基，培養至菌絲長滿培養基為止；所述誘導培養基含有用于誘導香菇菌株提升綠霉病抗病性的去活深綠木霉發酵液；采用含0.75?1.5％去活的深綠木霉發酵液的誘導培養基培養1?5次，能有效提升菌株的抗性；所述香菇綠霉病強抗性菌株培育方法的應用，其可應用于防治木霉菌引起袋栽或瓶栽食用菌的病害。

技術領域

本發明屬于食用菌強抗性菌株培育方法領域，更具體地，涉及一種香?菇綠霉病強抗性菌株的培育方法及其應用。

背景技術

木霉屬真菌(Trichoderma?spp.)是食用菌綠霉病害的主要侵染源，常見的?有綠木霉(T.cf.virensv?VonArx)、長枝木霉(T.longibrachiatum?Rifai)、哈茨?木霉(T.harzianum?Rifai)、深綠木霉(T.atrovide?Karsten)、棘孢木霉?(T.asperellumSamuels,LieckfNirenberg)等，木霉菌可直接污染培養料，?或侵染長滿香菇菌絲體的菌棒，其引起的綠霉病是香菇栽培生產中最為嚴?重的病害，常在香菇栽培生產初期帶來嚴重損失。

化學殺菌藥劑對真菌具有殺菌作用，但食用菌和木霉菌都屬于真菌，?且木霉菌是寄生在食用菌中，絕大部分化學殺菌藥劑在殺滅木霉菌的同時?也會殺滅食用菌，這也是食用菌病害防治中缺少有效藥劑的重要原因。目?前食用菌綠霉病防治僅有有限的幾種化學藥劑，如咪鮮胺錳鹽、噻菌靈等，?但都是適合于床式或畦式栽培的食用菌如雙孢蘑菇，對于袋栽或者瓶栽的?食用菌如香菇，其化學藥劑施用方式非常不友好。

就目前來說，防治食用菌綠霉病最有效的方法是篩選抗病品種和控制?環境衛生，目前除嚴格控制接種和栽培環境外，尚缺乏優質的抗病品種，?而香菇中提高綠霉病抗性的方法也尚未見相關報道。

發明內容

針對現有技術的以上缺陷或改進需求，本發明提供了一種香菇綠霉病?強抗性菌株的培育方法，其目的在于通過在培養基中添加去活的深綠木霉?發酵液，并對香菇菌株進行多次誘導培養，每次誘導培養后采用菌落侵染?法進行抗性評價，篩選拮抗能力變化大于等于20％的菌株，依據拮抗能力?變化越大，抗性越強的原則選擇合適的抗病菌株，由此解決缺乏優質的抗?綠霉病品種的技術問題。

為實現上述目的，按照本發明的一個方面，提供了一種香菇綠霉病強?抗性菌株的培育方法，其包括以下步驟：

獲取待選香菇菌種，進行至少一次誘導培養，每次誘導培養結束后進?行抗性評價，篩選拮抗能力變化大于等于預設閾值的菌株，依據拮抗能力?變化越大，菌株抗性越強的原則直至篩選出合適強抗性菌株；

所述誘導培養具體為：

將上一代的香菇菌種單菌落接種于誘導培養基，培養至菌絲長滿培養?基為止；所述誘導培養基含有用于誘導香菇菌株提升綠霉病抗病性的深綠?木霉發酵液，所述深綠木霉發酵液為去活的深綠木霉發酵產物；所述去活?的深綠木霉發酵產物為除去深綠木霉菌活細胞和孢子的發酵液。

優選地，所述香菇綠霉病強抗性菌株的培育方法，其所述去活的深綠?木霉發酵產物，按照以下制備方法獲得：

在活化后的深綠木霉菌落邊緣取菌種，按照菌種添加比例加入到液體?培養基中，恒溫振蕩暗培養預設時間，培養結束后分離過濾獲取深綠木霉?發酵液，獲取的深綠木霉發酵液經滅菌獲得所述去活的深綠木霉發酵液。

優選地，所述香菇綠霉病強抗性菌株的培育方法，其所述去活的深綠?木霉發酵液，其菌種添加比例為每200ml液體培養基加入2-5個直徑7-9mm?菌餅或相應大小的深綠木霉菌塊。