[發明專利]一種假節桿菌PL-410及其在產軟骨素裂解酶中的應用

在審

• 申請號: 202210022096.6
• 申請日: 2022-01-10
• 公開（公告）號: CN114480182A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 尚楠;肖夢圓;武瑞赟;李平蘭
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/88;C40B50/06;C12P19/12;C12P19/04;C12P19/00;A61K35/74;A61P19/00;A61P19/08;C12R1/01
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 孫怡

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一種假節桿菌PL?410及其在產軟骨素裂解酶中的應用。本發明提供的假節桿菌(Pseudarthrobacter sp.)PL?410，其保藏編號為CGMCC No.22736。本發明的假節桿菌(Pseudarthrobacter sp.)PL?410，其可以制備軟骨素裂解酶(AC型)，該酶可用于研究硫酸軟骨素的結構，構建硫酸軟骨素寡糖文庫，也可應用于醫藥領域，具有廣闊的應用前景。

技術領域

本發明涉及微生物技術領域，具體涉及一種假節桿菌PL-410及其在產軟骨素裂解酶中的應用。

背景技術

硫酸軟骨素(chondroitin sulfate，CS)是一類從動物組織中提取出的糖胺聚糖，廣泛存在于脊椎動物結締組織的細胞表面和細胞外基質中，具有多種生物活性，如修復關節軟骨、抗氧化、延緩衰老、抗凝血、抗血栓、降血脂、抗動脈粥狀硬化及抗腫瘤等，廣泛應用于醫藥、食品和化妝品行業。常見的CS具有高分子量和高電荷密度，從而導致其生物利用率較低，限制了其生物功效的發揮。越來越多的證據表明，低分子量CS具有黏度小、溶解性好、易吸收等優點，可有效克服CS生物利用率低的缺點。

目前，低分子量CS主要通過酸降解法、氧化降解法、超聲降解法、輻射降解法以及酶降解法獲得。其中，酶降解法具有反應條件溫和、催化效率高、操作簡單、作用底物專一、產物分子量可控性高、過程無污染、對CS的降解產物影響小的優點，因此具有更高的性價比和優勢。

細菌來源的軟骨素裂解酶(chondroitinase，Chase)是一類可降解CS等糖胺聚糖的裂解酶，作用于CS二糖單位之間的β-1,4糖苷鍵，通過β-消除的方式將CS裂解為不飽和二糖及寡糖，并在產物的非還原端形成4,5-不飽和糖醛酸。Chase降解CS等糖胺聚糖，生成二糖及寡糖，不僅用于高效制備具有多種生物活性的CS低聚糖；還可作為工具酶，用于構建二糖和寡糖的文庫，研究糖胺聚糖的結構和性質；還可用于檢測藥物及各種組織中CS的含量；此外，Chase可特異性地降解硫酸軟骨素蛋白聚糖，從而使硫酸軟骨素蛋白聚糖恢復正常水平，機體恢復正常功能，調節機體中硫酸軟骨素蛋白聚糖含量，減少脊髓損傷、腰椎間盤突出、弱視等疾病的發生，在醫學領域具有廣泛的應用價值。

綜上所述，軟骨素裂解酶不僅可以用于制備高活性的低分子量硫酸軟骨素，還可作為研究糖胺聚糖結構和性質的工具酶，最重要的是，其本身具有多種藥用價值，可以在疾病治療中發揮獨特的作用。但目前具有應用價值的高活力軟骨素裂解酶很少，因此篩選新型軟骨素裂解酶產生菌，并分離和鑒定新型穩定高活力的軟骨素裂解酶具有重要意義。鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的目的是提供一種可以制備軟骨素裂解酶的假節桿菌。該酶可降解硫酸軟骨素A和C，是一類軟骨素裂解酶AC型。

為了實現本發明的目的，本發明的技術方案如下：

本發明提供的假節桿菌(Pseudarthrobacter sp.)PL-410，該菌株于2021年6月21日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101)，分類命名為假節桿菌Pseudarthrobacter sp.，保藏編號為CGMCC No.22736。

進一步地，本發明還提供假節桿菌(Pseudarthrobacter sp.)PL-410的發酵產物。含有假節桿菌(Pseudarthrobacter sp.)PL-410或發酵產物的菌劑。

本發明所述的菌劑可以為液體菌劑或固體菌劑，可采用常規技術手段、加入微生物制劑領域允許的輔料制備得到。