[發(fā)明專利]一種檢測腫瘤的標(biāo)志物及在制備檢測腫瘤試劑中的應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202210015459.3
• 申請日: 2022-01-07
• 公開（公告）號: CN114324871A
• 公開（公告）日: 2022-04-12
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 包勇
• 申請（專利權(quán)）人: 南京棠思生物醫(yī)藥科技有限公司
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574;C07K14/47;C12Q1/6886;C12N15/11
• 代理公司: 北京慕達(dá)星云知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 崔自京

本發(fā)明公開了一種檢測腫瘤的標(biāo)志物，包括p?S351?Rasal2，所述p?S351?Rasal2表示Rasal2蛋白第351位磷酸化的多肽序列，如SEQ ID NO.1所示。將p?S351?Rasal2應(yīng)用于制備檢測腫瘤的試劑和系統(tǒng)中，可以提高檢測腫瘤的準(zhǔn)確性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及腫瘤標(biāo)志物檢測技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說是涉及一種檢測腫瘤的標(biāo)志物及在制備檢測腫瘤試劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病，大部分的腫瘤在確診時已經(jīng)到了晚期，失去了手術(shù)的意義。因此腫瘤的早期診斷和綜合治療可以顯著提高療效和改善預(yù)后。腫瘤標(biāo)志物是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生或宿主對腫瘤刺激異常產(chǎn)生或表達(dá)的一類特異性物質(zhì)，對腫瘤的臨床診斷、治療和預(yù)后監(jiān)測起重要作用。

目前比較公認(rèn)的腫瘤標(biāo)志物包括組織特異性的標(biāo)志物，如雌激素受體ER(乳腺癌)、前列腺特異性抗原PSA(前列腺癌)等，也包括多組織通用的標(biāo)志物如上皮生長因子受體EGFR(結(jié)直腸癌、肺癌等)、原癌基因Her-2/neu(乳腺癌、胃癌等)。部分腫瘤標(biāo)志物還可用于預(yù)測對治療措施(包括藥物化療、放射治療、免疫治療)的敏感性。除了傳統(tǒng)的蛋白類標(biāo)志物以外，近年隨著新技術(shù)的發(fā)展和新概念的提出，部分核酸類分子如miRNA也可作為腫瘤標(biāo)志物。

眾所周知，Ras過度激活是導(dǎo)致腫瘤發(fā)生和發(fā)展的一個重要因素。Ras GAPs通過增加Ras GTPase酶活性促進(jìn)GTP轉(zhuǎn)化為GDP從而抑制Ras的活性。Rasal2屬于Ras GAPs的一種，因此被認(rèn)為是一種腫瘤抑制因子，在大部分的癌癥組織中表達(dá)偏低，如管腔B型乳腺癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌和鼻咽癌等等。然而，在三陰性乳腺癌(TNBC)中，Rasal2過表達(dá)，同時促進(jìn)腫瘤的侵襲，發(fā)揮致癌作用。在結(jié)直腸癌，Rasal2通過上調(diào)LATS2/YAP1信號通路，能夠促進(jìn)結(jié)直腸癌的發(fā)生和發(fā)展。因此，Rasal2在癌癥中的作用與腫瘤的不同類型以及同種腫瘤的不同亞型有關(guān)。

在研究Rasal2的信號通路過程中，即使Rasal2蛋白表達(dá)與腫瘤的種屬有關(guān)，然而Rasal2第351位磷酸化，卻能夠有效的誘導(dǎo)自噬的形成，從而增加腫瘤對于外界應(yīng)激的抵抗和耐藥性的產(chǎn)生，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。相比于Rasal2表達(dá)對腫瘤發(fā)生和發(fā)展的影響存在抑制或促進(jìn)的兩種矛盾的作用方式，Rasal2第351位磷酸化在腫瘤有著普遍的一致性，并且Rasal2磷酸化與Rasal2表達(dá)量的比值(即：p-S351-Rasal2/Rasal2)在正常細(xì)胞和組織幾乎接近于0，而在腫瘤細(xì)胞和組織中卻有很高的表達(dá)，并且該比值與腫瘤的耐藥性，腫瘤的級別，分化程度以及預(yù)后均呈明顯正相關(guān)。因此，Rasal2第351位磷酸化水平與Rasal2蛋白表達(dá)水平的比值(即：p-S351-Rasal2/Rasal2)的高低，能夠預(yù)示腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，以及對化療產(chǎn)生耐藥性能力的強弱，具有重要的臨床應(yīng)用意義。

因此，如何提供一種新的腫瘤標(biāo)志物并將其應(yīng)用于檢測腫瘤中是本領(lǐng)域技術(shù)人員亟需解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明提供了一種檢測腫瘤的標(biāo)志物p-S351-Rasal2，并通過計算Rasal2蛋白第351位磷酸化多肽序列的表達(dá)水平與Rasal2蛋白表達(dá)水平的比值確定腫瘤的發(fā)生和發(fā)展情況。

為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種檢測腫瘤的標(biāo)志物包括p-S351-Rasal2，所述p-S351-Rasal2表示Rasal2蛋白第351位磷酸化的多肽序列，所述序列為IFARTTS(p)KTKADNI，如SEQ ID NO.1所示。

作為與上述技術(shù)方案相同的發(fā)明構(gòu)思，本發(fā)明還請求保護(hù)p-S351-Rasal2在制備檢測腫瘤試劑中的應(yīng)用。

作為與上述技術(shù)方案相同的發(fā)明構(gòu)思，本發(fā)明還請求保護(hù)一種檢測腫瘤的試劑，包括：與p-S351-Rasal2多肽序列特異性結(jié)合的多克隆抗體蛋白。

一種檢測腫瘤標(biāo)志物的引物，所述引物序列為：