[發明專利]嵌合內溶素多肽

在審

• 申請號: 202180043760.9
• 申請日: 2021-04-16
• 公開（公告）號: CN116096398A
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: F·艾興澤埃爾;M·施梅爾歇爾;C·A·勒里希
• 申請（專利權）人: 邁克瑞歐斯人體健康有限公司
• 主分類號: A61K38/47
• 分類號: A61K38/47
• 代理公司: 永新專利商標代理有限公司 72002
• 代理人: 左路;區斌

本發明涉及醫學領域，特別涉及葡萄球菌感染相關病癥的治療領域。本發明涉及一種特異性地靶向葡萄球菌細菌細胞的新型內溶素多肽。本發明進一步涉及用于醫療用途，優選地用于治療患有葡萄球菌感染相關病癥的個體的所述內溶素多肽。

技術領域

本發明涉及醫學領域，特別涉及葡萄球菌(Staphylococci)感染相關病癥的治療領域。本發明涉及一種特異性地靶向葡萄球菌細菌細胞的新型內溶素多肽。本發明進一步涉及用于醫療用途，優選地用于治療患有葡萄球菌感染相關病癥的個體的所述內溶素多肽。

背景技術

葡萄球菌屬的革蘭氏陽性細菌是人類衛生保健中的一個主要問題，這主要是由于抗生素抗性的日益普遍而導致的。它們幾乎可以感染任何組織，包括皮膚、軟組織、骨、心臟、肺，甚至腦(Tong,2015)。另外，生物膜可以例如在假體器械和導管上充當全身性感染和膿毒癥(sepsis)的感染中心。最常見的細菌物種是凝固酶陽性金黃色葡萄球菌(S.aureus)和凝固酶陰性表皮葡萄球菌(S.epidermidis)。葡萄球菌感染通常難以治療，因為抗生素抗性水平很高，并且進入感染中心受到物理上的限制。對有效對抗葡萄球菌的新型藥物有很高的需求。

肽聚糖水解酶(PGH)可以裂解細菌肽聚糖(PG)網絡內的特異性鍵，并已被示出對生物膜具有活性。它們的高溶解活性使PGH成為強效的抗葡萄球菌劑。內溶素是高度特異性的、噬菌體衍生的PGH，對藥物敏感性和抗藥性細菌二者都具有活性(Schmelcher?etal.2012)。作為抗生素的潛在替代品，它們已經在體外和體內進行了研究，并且正在若干臨床研究中進行試驗(Kashani?et?al.2017)。葡萄球菌的PGH通常顯示出結構域樣架構，由酶促活性結構域(EAD)和細胞壁結合結構域(CBD)組成。葡萄球菌PGH的高特異性可能歸因于其CBD，所述CBD的特征通常在于SH3b倍。葡萄球菌內溶素SH3b結構域的結構已被解決，并且顯示出與細菌素溶葡萄球菌素(LST)和ALE1的高度同源性，這表明PG中存在共同的識別位點。

EAD更具多樣性，并且可以根據其結構和PG內的裂解位點進行分組。半胱氨酸、組氨酸依賴性酰胺水解酶/肽酶(CHAP)結構域經常發現于葡萄球菌溶解性內溶素中，例如發現于噬菌體Twort或噬菌體K中(et?al.2006)。取決于存在的CHAP結構域，裂解可以發生在PG中的不同位置，包括糖骨架與莖肽(stem?peptide)的酰胺鍵以及莖肽與肽橫橋的連接(圖1)。在本文中，CHAP結構域的酰胺水解酶/肽酶活性被稱為CHAP活性。M23結構域僅發現于一種內溶素(噬菌體2638)中，但也存在于葡萄球菌細菌素LST及其同源物ALE1中。LST和ALE1的M23結構域裂解五甘氨酸橫橋，其連接金黃色葡萄球菌PG中的相鄰莖肽，然而噬菌體2638的M23結構域在肽橋與莖肽之間切割(圖1)(Gründling?et?al.2006；Schmelcher?et?al.2015JAC)。在本文中，M23結構域的肽酶活性被稱為M23肽酶活性或M23活性。

先前，在牛奶中對單獨的抗金黃色葡萄球菌PGH與PG中的正交切割位點的組合的有效性進行了陽性評估(Verbree?et?al.2018)。這可能是因為PG網絡內的一個鍵的裂解可以導致三維PG網絡內不同鍵的可接近性更好。

總之，尤其是對于全身性感染和膿毒癥以及假體器械和導管而言，需要一種單內溶素多肽，其具有改進的針對凝固酶陽性和凝固酶陰性葡萄球菌物種(如金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌)二者的抗微生物活性和穩定性特征。

發明內容

本發明人已經確認，M23內肽酶和單嵌合內溶素多肽上的CHAP結構域的組合提供了期望的改進活性和穩定性，尤其是在人血清中。

因此，在第一方面，提供了一種對葡萄球菌具有溶解活性的內溶素多肽，所述多肽包含：

-具有半胱氨酸、組氨酸依賴性氨基肽酶(CHAP)活性的多肽結構域；

-具有M23肽酶活性的多肽結構域；

-具有細胞壁結合活性的多肽結構域；