[發明專利]Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因過表達MDCK單克隆細胞系構建方法在審
| 申請號： | 202111654095.5 | 申請日： | 2021-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN114277059A | 公開（公告）日： | 2022-04-05 |
| 發明（設計）人： | 王娜;李筱楠;吳秀穩 | 申請（專利權）人： | 河北醫科大學 |
| 主分類號： | C12N15/867 | 分類號： | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/62;C12R1/91 |
| 代理公司： | 重慶知育道知識產權代理事務所(普通合伙) 50296 | 代理人： | 楊志杰 |
| 地址： | 050499 河*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | grx rogfp gpx3 基因 表達 mdck 單克隆 細胞系 構建 方法 | ||
【權利要求書】：
1.Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因過表達MDCK單克隆細胞系構建方法，其特征在于：其構建方法步驟如下：
步驟一：首先將目的基因Grx-roGFP和Gpx-roGFP克隆至慢病毒載體pLV-puro上；
步驟二：進一步用慢病毒載體pLV-W包裝成慢病毒后感染MDCK細胞，通過puromycin篩選W基因過表達穩定細胞株，從而，構建了可實時動態觀察腎細胞線粒體內氧化還原動態的細胞系。
2.根據權利要求1所述的Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因過表達MDCK單克隆細胞系構建方法，其特征在于：所述步驟一的具體步驟如下：
S1：首先選取雙酶切基因片段Grx-roGFP和Gpx-roGFP和載體；
S2：進一步將酶切好的Grx-roGFP和Gpx-roGFP連接到pLV-puro載體上；
S3：進一步進行PCR克隆鑒定。
3.根據權利要求1所述的Grx-roGFP/Gpx3-roGFP基因過表達MDCK單克隆細胞系構建方法，其特征在于：所述步驟二的具體步驟如下：
S1：首先進行質粒提取；
S2：進一步進行慢病毒包裝；
S3：進一步感染慢病毒感染MDCK細胞和并進行篩選。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于河北醫科大學，未經河北醫科大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/202111654095.5/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種水下推進器
- 下一篇：一種模型測評方法、系統及存儲介質
