[發明專利]一種多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法在審
| 申請號： | 202111650231.3 | 申請日： | 2021-12-30 |
| 公開（公告）號： | CN114324210A | 公開（公告）日： | 2022-04-12 |
| 發明（設計）人： | 何亞清;曹雪華;吳文靜;魏東升;王萌;岳述榮 | 申請（專利權）人： | 上海瑞邦生物材料有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/31 | 分類號： | G01N21/31 |
| 代理公司： | 上海邦德專利代理事務所(普通合伙) 31312 | 代理人： | 梁劍 |
| 地址： | 201707 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 多孔 磷酸鈣 蛋白質 負載量 檢測 方法 | ||
1.一種多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，包括：
(1)將負載有蛋白質的多孔磷酸鈣溶解于鹽酸溶液中，獲得測試液；
(2)向所述測試液中加入Bradford工作液進行反應，獲得反應液；
(3)測量所述反應液的吸光度；
(4)確定所述反應液的吸光度所對應的蛋白質濃度；
(5)基于所述蛋白質濃度，確定所述多孔磷酸鈣的蛋白質負載量。
2.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述蛋白質為rhBMP-2蛋白質。
3.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述步驟(1)中，所述鹽酸溶液的濃度為0.5mol/L-2mol/L。
4.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述步驟(1)中，
所述負載有蛋白質的多孔磷酸鈣與所述鹽酸溶液的使用量比為1g：10-40mL。
5.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述步驟(3)中，
所述吸光度為在500nm-600nm波長光處的吸光度。
6.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述向所述測試液中加入Bradford工作液進行反應，包括：所述反應溫度為20-40℃，所述反應時間為5-10min。
7.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述步驟(4)包括：
獲得吸光度與蛋白質濃度對應的標準曲線；
將所述反應液的吸光度帶入所述標準曲線，獲得所述反應液的吸光度對應的蛋白質濃度。
8.根據權利要求7所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述獲得吸光度與蛋白質濃度對應的標準曲線包括：
制備梯度濃度的蛋白質溶液，
檢測不同濃度所述蛋白質溶液的吸光度，
以蛋白質濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標，制得反映蛋白質濃度與吸光度關系的標準曲線。
9.根據權利要求8所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述制備梯度濃度的蛋白質溶液，包括：
所述梯度濃度的蛋白質溶液中蛋白質為標準牛血清蛋白。
10.根據權利要求1所述的多孔磷酸鈣的蛋白質負載量的檢測方法，其特征在于，所述步驟(5)包括，
所述蛋白質濃度與所述測試液體積的乘積除以所述負載有蛋白質的多孔磷酸鈣的質量，即為所述多孔磷酸鈣的蛋白質負載量。
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