[發(fā)明專利]一種線性硬毛藻提取的粗多糖在制備非酒精性脂肪性肝藥物中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111569292.7
• 申請日: 2021-12-21
• 公開（公告）號: CN115317502B
• 公開（公告）日: 2023-07-07
• 發(fā)明（設計）人: 褚雪汝;李國云;于廣利;辛永寧
• 申請（專利權(quán)）人: 青島市市立醫(yī)院
• 主分類號: A61K31/715
• 分類號: A61K31/715;A61K36/05;A61P1/16;A61P3/04;A61P3/10;C08B37/00;A01K67/027;A61K49/00
• 代理公司: 山東重諾律師事務所 37228
• 代理人: 冷奎亨

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，具體為一種線性硬毛藻提取的粗多糖在制備非酒精性脂肪性肝藥物中的應用，包括以下步驟：多糖提取、設置分組、飼養(yǎng)條件、進行建模、建模后檢測。本發(fā)明通過實驗證明，從野生毛藻中用熱水提取粗多糖CLH，在高脂誘導的NAFLD小鼠模型中，粗多糖CLH具有抑制肥胖，降低血糖，減少肝臟脂質(zhì)蓄積，起到對NAFLD的治療作用，基于CLH治療NAFLD的良好作用，其可用于NAFLD患者的臨床治療藥物的研發(fā)，效果顯著優(yōu)于其他試藥。

技術領域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術領域，具體為一種線性硬毛藻提取的粗多糖在制備非酒精性脂肪性肝藥物中的應用。

背景技術

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic?fatty?liver?disease,NAFLD)是慢性肝病(如肝纖維化和肝癌)和代謝紊亂(如肥胖、Ⅱ型糖尿病和動脈粥樣硬化)的最常見前兆之一[1]。NAFLD患者無法從這種情況中康復，相反，該疾病會繼續(xù)發(fā)展為非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、肝細胞纖維化、肝硬化，甚至肝細胞，而且作為代謝綜合征的重要組分與心腦血管疾病密切相關，嚴重影響了人們的身體健康和生活質(zhì)量，也給社會帶來沉重負擔。除了飲食和運動等干預措施外，目前還沒有可用于治療NAFLD的靶向藥物[2]。

毛藻屬屬于綠藻門，是生長在河口和海洋環(huán)境[3]中的不分枝絲狀單細胞綠藻。大約76種已知的毛形屬[4]。其中，亞麻屬植物具有很高的濕度，干燥后的殘渣主要由蛋白質(zhì)和碳水化合物組成。毛藻主要作為生態(tài)調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)河口生境的營養(yǎng)有效性，是一種膳食纖維，含有多種微量元素[5,6]。毛藻在我國分布廣泛，在醫(yī)藥和食品研究中均有應用。

最近，我們在中國榮城天鵝湖沿岸采集了一種野生毛藻，經(jīng)提取、純化和鑒定了多糖，發(fā)現(xiàn)提取的多糖幾乎是硫酸阿拉伯半乳聚糖。因此本發(fā)明旨在研究線性硬毛藻提取的粗多糖在治療小鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。

發(fā)明內(nèi)容

針對相關技術中的問題，本發(fā)明提出的一種線性硬毛藻提取的粗多糖在制備非酒精性脂肪性肝藥物中的應用，以克服現(xiàn)有相關技術所存在的上述技術問題，本發(fā)明的目的是從野生毛藻中用熱水提取粗多糖CLH，在高脂誘導的NAFLD小鼠模型中，粗多糖CLH具有抑制肥胖，降低血糖，減少肝臟脂質(zhì)蓄積，起到對NAFLD的治療作用，基于CLH治療NAFLD的良好作用，其可用于NAFLD患者的臨床治療藥物的研發(fā)，效果顯著優(yōu)于其他試藥。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術方案：

本發(fā)明提供一種線性硬毛藻提取的粗多糖在制備非酒精性脂肪性肝藥物中的應用，包括以下步驟：

(1)多糖提取：將野生毛藻在55℃干燥后粉碎，后脫脂脫鹽并濃縮凍干，用熱水提取粗多糖得CLH；

(2)設置分組：將野生型雄性C57BL/6J小鼠隨機分為對照組、模型組和預防組，每組包含小鼠6只；

(3)飼養(yǎng)條件：分籠飼養(yǎng)于SPF級動物飼養(yǎng)室，每籠3只小鼠，鼠齡為8周，所有小鼠先用普通維持飼料飼養(yǎng)一周，以便使小鼠適應環(huán)境；

(4)進行建模：適應環(huán)境之后開始進行建模，模型組(HFD)和治療組(CLH-50、CLH-150)小鼠給予高脂飼料，對照組(NC)給予普通維持飼料，每天一次15g定量補給飼料，保證50g/籠；

高低劑量治療組小鼠分別給予CLH?150mg/kg/天和50mg/kg/天，溶解在蒸餾水中口服，模型組和對照組給予等體積的蒸餾水；

(5)建模后檢測：建模9周后通過腹腔注射葡萄糖進行空腹血糖指標及糖耐量檢測，于10周進行摘眼球取血并用斷頸法將小鼠處死，檢測小鼠血糖血脂四項指標(TC、TG、LDL-c、HDL-c)和肝功指標(AST和ALT)，取小鼠新鮮肝臟組織進行勻漿，檢測肝臟內(nèi)TC和TG的含量，另取肝組織做石蠟和冰凍切片，分別進行H.E.和油紅O染色。