[發明專利]一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111560806.2
• 申請日: 2021-12-20
• 公開（公告）號: CN114344458A
• 公開（公告）日: 2022-04-15
• 發明（設計）人: 馮華朋;舒建洪;易若男;趙鎵燁;張金鴿;張興;何玉龍;查銀河
• 申請（專利權）人: 浙江理工大學紹興生物醫藥研究院有限公司;浙江洪晟生物科技股份有限公司;杭州洪晟生物技術股份有限公司
• 主分類號: A61K39/39
• 分類號: A61K39/39;A61K39/145;A61P31/14;A61P31/16
• 代理公司: 浙江納祺律師事務所 33257
• 代理人: 鄭滿玉;王士祥

1.一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：所述免疫增強劑含有1-1000μg/ml的蕓苔素內酯。

2.根據權利要求1所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：包含有滅活的抗原溶液。

3.根據權利要求2所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：還包括油相溶液、水相溶液，所述水相溶液包括免疫增強劑與滅活的抗原溶液，所述水相溶液中免疫增強劑與滅活的抗原溶液的體積之比為1:1.5-4；并且所述水相溶液與油相溶液的體積之比為6:8-16。

4.根據權利要求3所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：所述油相溶液包括油相油劑、油相乳化劑，所述油相乳化劑可以為司班85、司班83、司班80、司班65、司班60、吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫80、吐溫85、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸鋁中任一種或多種，所述油相油劑可以為藥用級白油、花生油、礦物油、植物油中任一種。

5.根據權利要求3或4所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：所述水相溶液還包括水相乳化劑，所述水相乳化劑可以為司班85、司班83、司班80、司班65、司班60、吐溫20、吐溫40、吐溫60、吐溫80、吐溫85、單硬脂酸甘油酯、硬脂酸鋁中任一種或多種。

6.根據權利要求2-4任一項所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗，其特征在于：所述滅活的抗原溶液為滅活的雞新城疫與H9亞型禽流感病毒。

7.一種如權利要求1-6任一項所述的基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗的制備方法，其特征在于：先將免疫增強劑、滅活抗原溶液、水相乳化劑混合，制備成水相溶液；再將油相油劑、油相乳化劑混合，得到油相溶液；將油相溶液與水相溶液混合，得到滅活疫苗。

8.一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟：

步驟1)將蕓苔素內酯溶解于生理鹽水中，制成母液，用注射器過濾膜以過濾除菌；

步驟2)將免疫增強劑、滅活的新城疫病毒液、滅活的禽流感H9N2亞型病毒液和吐溫80按照預設的體積比混合制備水相溶液，并且在混合加入吐溫80 后立即水浴，振蕩、混勻；

步驟3)將司班80和白油按照預設的體積比混合，并另外加入硬脂酸鋁制備獲得油相溶液；

步驟4)將油相溶液與水相溶液混合，通過高速乳化機攪拌，得到基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗。

9.根據權利要求8所述的一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗的制備方法，其特征在于該制備方法包括如下步驟：

步驟1)稱取30mg的蕓苔素內酯，溶解于含10％乙醇的10ml生理鹽水中，制成濃度為3mg/ml的母液，用注射器過0.22μm的濾膜，過濾除菌；

步驟2)將免疫增強劑、滅活的新城疫病毒液、滅活的禽流感H9N2亞型病毒液和吐溫80按照2：1.88：1.8：0.24的體積比混合制備水相溶液，并且在混合加入吐溫80后立即水浴5min，振蕩、混勻；

步驟3)將司班80和白油按照1：19的體積比混合，并另外加入0.06mg的硬脂酸鋁制備獲得油相溶液；

步驟4)將油相溶液與水相溶液混合，通過高速乳化機13000rmp/min攪拌5min，得到基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗。

10.一種基于免疫增強劑蕓苔素內酯的滅活疫苗的應用。