[發(fā)明專利]同時(shí)檢測(cè)奧馬珠和IgE的蛋白芯片試劑盒

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111532761.8
• 申請(qǐng)日: 2021-12-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN116338165A
• 公開(kāi)（公告）日: 2023-06-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 崔洋;張芷蕙;楊曉;吉琛
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇三聯(lián)生物工程股份有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/535
• 分類號(hào): G01N33/535;G01N33/543;G01N33/68;G01N21/76
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)一種用于奧馬珠和IgE檢測(cè)的蛋白芯片及試劑盒，可同時(shí)檢測(cè)血液中奧馬珠和IgE的水平。所述蛋白芯片包括抗奧馬珠的特異性抗體，抗人IgE的特異性抗體。所述蛋白芯片，還包括陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照，在基片上均點(diǎn)制4個(gè)重復(fù)點(diǎn)，共6列。所述陽(yáng)性對(duì)照，是采用HRP標(biāo)記的抗體，所述陰性對(duì)照為鼠IgG，所述空白對(duì)照為不含抗體的點(diǎn)樣液。所述試劑盒包括上述蛋白芯片，還包括標(biāo)記有HRP酶或堿性磷酸酶的第二抗體溶液、檢測(cè)液A和檢測(cè)液B。所述第二抗體溶液含有抗人IgE抗體及抗奧馬珠抗體，所述檢測(cè)液A含有0.1～1％魯米諾和0.1～2％Tris，所述檢測(cè)液B含有0.1～1％過(guò)氧化氫。檢測(cè)方法為：收集樣本后，采用全自動(dòng)芯片分析儀，利用所述蛋白芯片檢測(cè)試劑盒對(duì)樣本進(jìn)行分析，同時(shí)給出樣本中奧馬珠和IgE的水平。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種奧馬珠殘留檢測(cè)試劑盒，特別是一種能夠?qū)W馬珠殘留和血液IgE同時(shí)檢測(cè)的試劑盒和檢測(cè)方法，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

隨著全球經(jīng)濟(jì)水平的快速發(fā)展、人們的生活方式及居住環(huán)境條件的巨大變化，疾病譜也隨之發(fā)生變化。2013年由世界衛(wèi)生組織召開(kāi)的世界衛(wèi)生大會(huì)上已經(jīng)明確提出：以過(guò)敏性疾病為代表的慢性非傳染性疾病（NCD），由于起病早、病情易波動(dòng)反復(fù)、臨床表型復(fù)雜多樣等特點(diǎn)，已成為全球公共衛(wèi)生關(guān)注的熱點(diǎn)。

過(guò)敏性疾病又稱變態(tài)反應(yīng)性疾病，是指機(jī)體對(duì)接觸的某些致敏物質(zhì)初次應(yīng)答致敏后，再次接觸相同致敏物質(zhì)刺激時(shí)，所出現(xiàn)的一種以生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷為主的異常免疫應(yīng)答的疾病。過(guò)敏性疾病從新生兒到老年人的各個(gè)年齡階段都可能發(fā)生，往往具有明顯的遺傳傾向。兒童過(guò)敏性疾病主要有過(guò)敏性休克、皮膚蕁麻疹、濕疹、過(guò)敏性鼻炎、過(guò)敏性哮喘、過(guò)敏性腸炎等。

對(duì)于過(guò)敏性疾病的診治，目前公認(rèn)最為安全有效的過(guò)敏疾病治療方法為注射奧馬珠抗體，注射前需要對(duì)過(guò)敏性患者的血液中IgE含量進(jìn)行定量測(cè)定，同時(shí)根據(jù)患者體重按照經(jīng)驗(yàn)確定給藥量和給藥間隔。由于沒(méi)有可靠的檢測(cè)患者血清中IgE的手段，治療依據(jù)不足，患者的治療效果往往不佳，或者在治療有效后過(guò)早停止用藥而復(fù)發(fā)，或者是用量過(guò)度增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，同時(shí)也會(huì)造成奧馬珠在體內(nèi)的殘留。

奧馬珠價(jià)格昂貴，如何合理用藥治療且盡可能地減少患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，也是必須考慮的，正確檢測(cè)血液中的抗體IgE是保證患者有效治療的關(guān)鍵，在檢測(cè)血液中IgE的同時(shí)，也檢測(cè)奧馬珠的含量，是確定治療合理用藥量的關(guān)鍵。本發(fā)明提供了一種同時(shí)檢測(cè)血液中奧馬珠和IgE的試劑盒和檢測(cè)方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題之一在于，提供一種同時(shí)檢測(cè)人血液樣本中總IgE及奧馬珠含量的蛋白芯片。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題之二在于，提供上述蛋白芯片的制備方法。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題之三在于，提供上述蛋白芯片的試劑盒，包括上述蛋白芯片和配套試劑。

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題之四在于，提供上述蛋白芯片試劑盒的應(yīng)用，用于同時(shí)檢測(cè)血液樣本中的總IgE和奧馬珠含量。

為解決上述技術(shù)問(wèn)題之一，本發(fā)明提供的蛋白芯片，包括基片、玻片上固定的特異性捕獲抗體：抗奧馬珠抗體，抗人IgE抗體。

所述基片包括經(jīng)過(guò)修飾的玻璃片、塑料片等用于蛋白芯片制備的硬質(zhì)材料。

所述蛋白芯片，還包括陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照。所述陽(yáng)性對(duì)照，是采用HRP標(biāo)記的抗體，所述陰性對(duì)照為鼠IgG，所述空白對(duì)照為不含抗體的點(diǎn)樣液。

所述蛋白芯片，是分別將特異性抗體、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照采用全自動(dòng)點(diǎn)樣儀點(diǎn)制與所述基片上。

所述特異性抗體、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照在芯片上均點(diǎn)制4個(gè)重復(fù)點(diǎn)。

上述的特異性抗體，是經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)篩選和比對(duì)，在保證了檢測(cè)結(jié)果特異性的同時(shí)，還保證檢測(cè)結(jié)果的靈敏性，芯片檢測(cè)的信噪比高、與待檢測(cè)物的濃度線性關(guān)系好。