[發(fā)明專利]一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111495287.6
• 申請日: 2021-12-08
• 公開（公告）號: CN114159583A
• 公開（公告）日: 2022-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳樞青;王洪亮
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)杭州國際科創(chuàng)中心
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K47/52;A61K39/00;A61P35/00
• 代理公司: 杭州裕陽聯(lián)合專利代理有限公司 33289
• 代理人: 金方瑋

本發(fā)明公開了一種ZIF?8多肽復(fù)合納米制劑，按照摩爾比包括：0.05?0.06份低等電點(diǎn)的多肽，1份鋅鹽，35?70份二甲基咪唑；低等電點(diǎn)pH包括：1?1.5、1.5?2、2?2.5、2.5?3、3?3.5、3.5?4、4?4.5、4.5?5、5?5.5、5.5?6、6.5?7、7?7.5；本發(fā)明的制劑僅用水作溶劑，無需有機(jī)溶劑，環(huán)保安全；通過本發(fā)明的方法合成得到的ZIF?8多肽復(fù)合納米顆粒具有均一的尺寸形貌，具有PH響應(yīng)和高多肽負(fù)載率的優(yōu)點(diǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥和藥物制劑學(xué)領(lǐng)域，特別是一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

個(gè)體化新抗原(neoantigen)癌癥疫苗的開發(fā)和應(yīng)用，已經(jīng)成為癌癥免疫治療的一條新途徑。然而，由于單一的裸肽疫苗只能產(chǎn)生較低的免疫原性。這是由于裸肽容易在體內(nèi)被分解清除，并且被抗原遞送呈細(xì)胞(APC)，例如樹突狀細(xì)胞(DC)吞噬遞呈的效率低下。

ZIF-8是金屬有機(jī)框架(MOFs)大家庭中常見的一種晶態(tài)多孔材料，它是由鋅離子和二甲基咪唑有機(jī)配體通過配位鍵形成的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。

ZIF-8屬于納米遞送載體，納米遞送載體具有良好的生物相容性和獨(dú)特的理化性質(zhì)，能夠有效地遞送抗原，通過調(diào)控抗原在抗原提呈細(xì)胞內(nèi)的呈遞途徑，在激發(fā)機(jī)體的體液免疫基礎(chǔ)上，可以進(jìn)一步激活抗原特異性的細(xì)胞免疫反應(yīng)。

常見的納米遞送載體包括納米脂質(zhì)體、高分子納米顆粒、無機(jī)納米顆粒等。然而這些傳統(tǒng)的納米遞送載體制備過程中常需要有機(jī)溶劑作溶劑，例如脂質(zhì)體需要使用乙醇做溶劑，高分子PLGA納米顆粒需要用丙酮或者氯仿等做溶劑，有機(jī)溶劑的生物安全性、環(huán)保性、純化難度成為了不可少的考量因素。此外脂質(zhì)體或者PLGA顆粒很難做到高多肽負(fù)載率，這會(huì)導(dǎo)致多肽藥物產(chǎn)生較多的浪費(fèi)，并且為后續(xù)的純化帶來了挑戰(zhàn)。此外，當(dāng)納米顆粒被APC細(xì)胞吞噬之后，如何將遞送的抗原分子釋放到細(xì)胞質(zhì)中也是一個(gè)極具挑戰(zhàn)的問題。

ZIF-8本身具有高孔隙率、高比表面積，并且具有很好的生物安全性，因此它在生物領(lǐng)域(包括診斷、小分子載藥等)具有廣泛的應(yīng)用。但是現(xiàn)有技術(shù)制備ZIF-8納米遞送載體通常需要使用有機(jī)溶劑，市場未開發(fā)出在水相中使用ZIF-8包裹多肽藥物的方法，本發(fā)明解決這樣的問題。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑及其制備方法，僅用水作溶劑，無需有機(jī)溶劑，環(huán)保安全；合成得到的ZIF-8多肽復(fù)合納米顆粒具有均一的尺寸形貌，具有PH響應(yīng)和高多肽負(fù)載率的優(yōu)點(diǎn)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑，按照摩爾比包括：0.05-0.06低等電點(diǎn)的多肽：1鋅鹽：35-70二甲基咪唑；低等電點(diǎn)pH包括：1-1.5、1.5-2、2-2.5、2.5-3、3-3.5、3.5-4、4-4.5、4.5-5、5-5.5、5.5-6、6.5-7、7-7.5。

前述的一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑，低等電點(diǎn)pH包括：3.5-4.5。

前述的一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑，鋅鹽包括：六水合硝酸鋅、無水硝酸鋅、無水醋酸鋅、二水合醋酸鋅、氯化鋅、一水合硫酸鋅、七水合硫酸鋅、無水硫酸鋅中的一種或多種。

前述的一種ZIF-8多肽復(fù)合納米制劑，低等電點(diǎn)的多肽的序列包括：

DDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDD SEQID01，等電點(diǎn)pH＝4.18；

Cy3-DDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDD SEQID02，等電點(diǎn)pH＝4.18；

DDDDD-VNYIKGFRYELYCLARTARTPLK-DDDDD SEQID04，等電點(diǎn)pH＝3.67。