[發明專利]一種用于檢測魚肉制品中巴丁魚成分的引物組合、方法及其應用

在審

• 申請號: 202111482222.8
• 申請日: 2021-12-06
• 公開（公告）號: CN114480664A
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 李家僑;張娜;謝艷輝;唐媛媛;斯澤恩;鄭舒尹
• 申請（專利權）人: 湛江海關技術中心
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 北京市廣友專利事務所有限責任公司 11237
• 代理人: 張仲波

1.一種用于檢測魚肉制品中巴丁魚成分的引物組合，其特征在于，包含用于擴增包含巴丁魚COI基因中第一特異區段的核苷酸片段的第一引物對和用于擴增包含巴丁魚COI基因中第二特征區段的核苷酸片段的第二引物對；其中，所述第一特征區段的核苷酸序列為SEQ ID NO:2；第二特征區段的核苷酸序列為SEQ ID NO:3。

2.如權利要求1所述的引物組合，其特征在于，所述第一引物對包含SEQ ID NO:4和SEQID NO:5。

3.如權利要求1所述的引物組合，其特征在于，所述第二引物對包含SEQ ID NO:6和SEQID NO:7。

4.如權利要求1所述的引物組合，其特征在于，所述第一引物和/或第二引物還包含熒光基團或顯色基團。

5.如權利要求1-4中任一項所述的引物組合，其特征在于，所述第一引物對由SEQ IDNO:4和SEQ ID NO:5組成；所述第二引物對由SEQ ID NO:6和SEQ ID NO:7組成。

6.一種用于檢測魚肉制品中巴丁魚成分的方法，其特征在于，包括：

1)提取待檢樣本的基因組；

2)利用如權利要求1-4中任一項所述的第一引物對和第二引物對分別進行擴增反應，獲得第一擴增產物和第二擴增產物；

3)基于所述第一擴增產物和第二擴增產物的指示特征確定檢測結果；

所述指示特征包括擴增產物的大小、核苷酸序列、熒光強度和顯色情況中的一種或多種。

7.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述第一引物對由SEQ ID NO:4和SEQ IDNO:5組成；

優選地，所述第一引物對的擴增條件為：

94℃預變性5min，94℃變性30S，55℃退火40S，72℃延伸30S，共40個循環；72℃10min。

8.如權利要求6所述的方法，其特征在于，所述第二引物對由SEQ ID NO:6和SEQ IDNO:7組成；

優選地，所述第二引物對的擴增條件為：

94℃預變性5min，94℃變性30S，55℃退火40S，72℃延伸30S，共40個循環；72℃10min。

9.如權利要求1-5中任一項所述的引物組合，或者如權利要求6-8所述的方法在魚肉制品檢測中的應用。

10.一種用于檢測魚肉制品中巴丁魚成分的試劑盒，其特征在于，包含如權利要求1-5中任一項所述的引物組合。