[發明專利]一種流式熒光檢測方法

在審

• 申請號: 202111473164.2
• 申請日: 2021-12-03
• 公開（公告）號: CN114088678A
• 公開（公告）日: 2022-02-25
• 發明（設計）人: 華婷婷
• 申請（專利權）人: 嘉興市唯真生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 深圳市君勝知識產權代理事務所(普通合伙) 44268
• 代理人: 王婭潔

本發明提供了一種流式熒光檢測方法，所述方法包括：采用激光器照射位于檢測區域的待測樣本；通過前向散射光檢測器獲取所述微球的前向散色值，并根據所述前向散色值的大小確定所述微球的直徑；根據所述微球的直徑確定所述微球攜帶的所述抗原的種類；通過熒光檢測器檢測所述抗原發出的熒光的強度，并根據所述熒光的強度確定抗原的濃度。本發明中通過所述微球的直徑大小直接確定所述抗原的種類，進而可以直接確定所測生理指標的類型，從而節省了流式熒光檢測機構中的用于區分抗原類型的激光器和相應的檢測器，降低了檢測的成本。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，尤其涉及的是一種流式熒光檢測方法。

背景技術

目前，主流的流式熒光儀器，主要采用兩種熒光素以區分待測熒光免疫結合物，且每種熒光素包含10種強度的熒光分子，這樣兩種熒光素就可以最多確定100種熒光免疫結合物，但是，該方案需要采用兩個激光器來照射熒光免疫結合物，并需要設置多個檢測器對熒光進行檢測，其中一個激光器配合兩個熒光檢測器來實現對熒光免疫結合物的區分，另一個激光器配合一個熒光檢測器來實現對抗原濃度的檢測，因而檢測的成本相對較高。

因此，現有技術還有待于改進和發展。

發明內容

鑒于上述現有技術的不足，本發明的目的在于提供一種流式熒光檢測方法，旨在解決現有技術中的采用流式熒光儀器檢測時檢測成本較高的問題。

本發明的技術方案如下：

一種流式熒光檢測方法，所述方法包括：

采用激光器照射位于檢測區域的待測樣本，以使所述待測樣本中的微球向空間中發出散射光，并使所述微球攜帶的抗原發出熒光；

通過前向散射光檢測器獲取所述微球的前向散色值，并根據所述前向散色值的大小確定所述微球的直徑；

根據所述微球的直徑大小確定所述微球攜帶的所述抗原的種類；

通過熒光檢測器檢測所述抗原發出的熒光的強度，并根據所述熒光的強度確定抗原的濃度。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述微球為聚苯乙烯塑料微球。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述采用激光器照射位于檢測區域的待測樣本，以使待測樣本中的微球發出前向散射光，并使所述微球攜帶的抗原發出熒光之前包括：

在直徑不同的所述微球的表面結合特定種類的抗體；

將各所述微球加入血液中形成所述待測樣本，其中，所述血液中具有多種能夠與特定的所述抗體結合的抗原，所述抗原標記有熒光素；

將所述待測樣本輸送至流式熒光檢測機構的流動室中，并使所述待測樣本流經所述檢測區域。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述流動室內具有鞘液流，所述鞘液流和所述待測樣本形成的樣本流均流經所述流動室，且所述樣本流和所述鞘液流同軸流動，所述鞘液流包裹所述樣本流。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述前向散色值的大小與所述微球的直徑正相關。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述熒光的強度與對應種類的所述抗原的濃度正相關。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述通過熒光檢測器檢測所述抗原發出的熒光的強度具體包括：

通過所述熒光檢測器的信號接收器接收熒光信號；

所述信號接收器根據所述熒光信號生成脈沖信號；

根據所述脈沖信號，通過算法提取所述熒光的強度值。

所述流式熒光檢測方法，其中，所述通過所述熒光檢測器的信號接收器接收熒光信號包括：