[發明專利]一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 202111471262.2
• 申請日: 2021-12-03
• 公開（公告）號: CN114288266B
• 公開（公告）日: 2023-03-17
• 發明（設計）人: 趙謀明;袁丹;周非白
• 申請（專利權）人: 華南理工大學;廣州現代產業技術研究院
• 主分類號: A61K9/51
• 分類號: A61K9/51;A61K47/42;A23L29/00;A23P10/30
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林奕聰

本發明公開了一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒及其制備方法與應用。該制備方法包括：用胃蛋白酶和胰酶分段酶解大豆分離蛋白，在中性pH下經不同溫度熱處理后將其在堿性pH下孵育，攪拌再回調pH至中性，離心后收集上清液得粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒，干燥處理得粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒。所述納米顆粒具有納米級尺寸，平均粒徑為40～150nm，ζ電位為?15～?30mV。本發明首次利用熱耦合pH驅動調節顆粒的尺度及帶電性來制備粘液滲透型納米顆粒，使得納米顆粒的粘液滲透能力提升，可用于功能性食品、特醫食品以及醫藥中。本發明原料天然健康，制備過程綠色安全、能耗低，工藝操作簡單，能夠進行快速連續化生產，具有巨大的應用價值。

技術領域

本發明屬于納米載體材料領域，具體涉及一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒及其制備方法與應用。

背景技術

目前，胃腸道生理屏障是造成功能活性因子口服生物利用度低的主要原因。研究表明，功能活性因子經口服攝入后，在胃腸道中將依次面臨消化屏障(pH屏障和消化酶屏障)、粘液屏障和腸上皮細胞屏障。盡管納米載體對活性因子包埋遞送可以保護其避免被消化降解，但高粘彈性且動態更新的粘液層具有強大的捕獲和快速清除外源顆粒的能力，使得納米載體無法擴散穿透粘液層到達上皮細胞以實現進一步吸收。近年來，隨著對腸道粘液層結構及特性的深入研究，設計并開發克服粘液屏障的納米載體也受到越來越多的關注。

粘液層是以粘蛋白為主要結構成分形成的網狀凝膠，腸道粘液層厚度約為50-200μm，平均孔徑約10-200nm，粘蛋白寡糖側鏈中包含的末端唾液酸和硫酸鹽殘基使得粘液呈現電負性。粘液層可防止病菌在腸道內的侵襲并消除各種機械性刺激對上皮細胞的磨損，對腸道粘膜的完整性具有重要的保護作用。大量研究表明通過粘液溶解劑如N-乙酰半胱氨酸(NAC)和粘蛋白水解酶等修飾載體可以克服粘液凝膠屏障。然而，粘液溶解劑的使用對于粘液結構具有不可逆的破壞作用。近年來，通過調控納米顆粒的尺度、帶電性及表面親疏水性等構建的新型納米載體在克服粘液屏障中表現出巨大的潛力，并且不影響腸道粘液層正常的功能性質。已經發現，較小的納米載體可以避免空間阻塞，表面高而弱帶電性的載體尤其是高且等密度正負電荷的電中性納米載體可以避免與粘液層的靜電相互作用，親水性表面的載體則能避免與粘蛋白的疏水相互作用的，特別地，尺寸小于粘液孔徑的非相互作用納米顆粒可以自由擴散通過粘液層。例如，李志斌等報道了一種親水性高分子聚合物(PEG)修飾的金屬有機框架ZIF-8納米微球，實現了對ZIF-8納米微球粘液穿透能力的提升。

目前關于顆粒表面性質修飾以實現粘液層有效滲透的研究大多以無機材料為主，這大大限制了其在功能性食品、特醫食品以及生物醫藥等中的應用，并且載體顆粒制備過程復雜，相關研究工作仍主要集中在理論探究階段，而粘液滲透型載體的高效制備技術以及產業化生產可行性非常有限。因此，以生物基大分子為原料，結合簡便綠色安全的處理手段來制備粘液滲透型納米顆粒具有強大的開發前景及應用價值。

發明內容

為了克服現有技術存在的上述不足，本發明的目的是提供一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒及其制備方法與應用。

本發明的首要目的是為了提供一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒的制備方法，該方法安全性高、生物相容性好。

本發明的另一目的在于提供由上述方法制得的粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒。

本發明的再一目的在于提供上述粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒在功能活性因子包埋遞送中的應用。

本發明的目的至少通過如下技術方案之一實現。

一種粘液滲透型大豆蛋白納米顆粒的制備方法，包括以下步驟：

(1)將大豆分離蛋白分散在水中，攪拌混合均勻，得到蛋白分散液；

(2)調節步驟(1)所述蛋白分散液的pH值，在攪拌狀態下加入相應酶制劑進行分段酶解，酶解結束后調節酶解液pH至7.0-7.5，然后進行加熱處理，離心得到上清液；