[發明專利]一種CadR基因突變體、含突變體的重組載體及其應用

有效

• 申請號: 202111435335.2
• 申請日: 2021-11-29
• 公開（公告）號: CN114369606B
• 公開（公告）日: 2023-04-28
• 發明（設計）人: 陳少鵬;蔡葉申;朱凱麗;沈亮
• 申請（專利權）人: 中國科學院合肥物質科學研究院;皖南醫學院
• 主分類號: C12N15/31
• 分類號: C12N15/31;C12N15/70;C12N15/65;C12N1/21;C07K14/21;G01N21/64;C12R1/19
• 代理公司: 合肥市長遠專利代理事務所(普通合伙) 34119
• 代理人: 余婧

1.一種CadR基因突變體，其特征在于，所述基因突變體的核苷酸序列為如SEQ?ID?NO:6所示。

2.一種含權利要求1所述的CadR基因突變體的重組載體，其特征在于，所述重組載體中還含有組成型啟動子、pCadR啟動子和目的基因，所述組成型啟動子與權利要求1所述的CadR基因突變體可操作性地連接，且CadR基因突變體位于組成型啟動子下游，所述pCadR啟動子與目的基因可操作性地連接，且目的基因位于pCadR啟動子下游。

3.根據權利要求2所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體為雙向表達重組載體；其中，所述重組載體中組成型啟動子和pCadR啟動子的轉錄方向相反。

4.根據權利要求2所述重組載體，其特征在于，所述組成型啟動子為啟動子J23109。

5.根據權利要求2所述的重組載體，其特征在于，所述重組載體的出發載體為PSB1K3載體。

6.根據權利要求2-5任一項所述的重組載體，其特征在于，所述目的基因為報告基因；所述報告基因為GFP基因、RFP基因或者mcherry基因。

7.一種如權利要求2-6任一項所述的重組載體在以鎘作為誘導劑誘導蛋白表達中的應用，或者一種如權利要求6所述的重組載體作為鎘誘導型生物傳感器在檢測鎘含量中的應用。

8.一種含有如權利要求2-6任一項所述的重組載體的工程菌。

9.一種含有如權利要求2-6任一項所述的重組載體的工程菌在以鎘作為誘導劑誘導蛋白表達中的應用，或者一種含有如權利要求6所述的重組載體的工程菌作為鎘誘導型生物傳感器在檢測鎘含量中的應用。

10.一種檢測鎘含量的方法，其特征在于，以含有如權利要求6所述的重組載體的工程菌作為鎘誘導型生物傳感器進行檢測，其步驟包括：

S1、以處于對數生長期的工程菌菌液作為檢測菌液，將鎘標準溶液加入所述檢測菌液中，得到含梯度濃度鎘離子的誘導體系，然后進行誘導培養，誘導培養結束后檢測菌體中的熒光值，繪制標準曲線；

S2、將與鎘標準溶液相同體積的待測樣品溶液加入所述檢測菌液中，得到誘導體系，然后進行誘導培養，誘導培養結束后檢測菌體中的熒光值，根據標準曲線計算待測樣品溶液中的鎘含量。