[發(fā)明專利]一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202111420998.7
• 申請(qǐng)日: 2021-11-26
• 公開（公告）號(hào): CN113950978B
• 公開（公告）日: 2022-10-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫繼峰;宋倩;張靜燕;李萌;韓魯杰;徐立功;韓太利
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濰坊市農(nóng)業(yè)科學(xué)院（山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院濰坊市分院）
• 主分類號(hào): A01G2/30
• 分類號(hào): A01G2/30
• 代理公司: 北京華智則銘知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11573
• 代理人: 李樹祥

1.一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：包括如下步驟：

S1、砧木及接穗的準(zhǔn)備：選取抗性強(qiáng)、易出胚的雜交品種做砧木材料，選取皮色肉色脆綠的雜交品種做接穗材料，將砧木和接穗種子進(jìn)行播種并通過春化；砧木的出胚率優(yōu)于接穗的出胚率；

S2、定植：3月中上旬，將砧木和接穗種株剛要抽薹時(shí)定植于拱棚內(nèi)；

S3、嫁接環(huán)境管理：控制環(huán)境溫度使植株生長(zhǎng)，用矮壯素稀釋液進(jìn)行灌根；

S4、嫁接時(shí)間選擇：在砧木的第二個(gè)及以后的一級(jí)分支處作嫁接部位；接穗的選擇為長(zhǎng)度為6-10cm的一級(jí)分支；

S5、嫁接：將接穗芽嫁接在砧木植株上；

S6、嫁接后管理：嫁接完成后通過控制生長(zhǎng)環(huán)境溫度對(duì)嫁接植株進(jìn)行管理。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：該創(chuàng)制方法還包括：S7、游離小孢子培養(yǎng)，游離小孢子培養(yǎng)按如下步驟進(jìn)行：

（1）、控制嫁接植株的生長(zhǎng)環(huán)境溫度為15-20℃，去掉主薹，待一級(jí)側(cè)枝5朵花時(shí)，選取處于單核靠邊期或雙核早期的2.5-4.5mm的花蕾連著花枝，將花蕾保濕并放置于4℃冰箱中，黑暗條件下冷處理24小時(shí)后滅菌；

（2）、向滅菌后的花蕾中加入B5-13培養(yǎng)基，使小孢子游離出來；

（3）、接種前，將花蕾浸泡在濃度為70%的酒精中，浸泡1min后倒掉酒精，再加入濃度為7%的次氯酸鈉溶液浸泡10min，然后用無菌水沖洗；

（4）、將清洗完成后的花蕾在B5培養(yǎng)基中擠出小孢子；懸浮液經(jīng)50μm無菌微孔紗布過濾，將濾液進(jìn)行離心處理，獲得沉淀物；

（5）、在沉淀物中加10mL的B5培養(yǎng)基，搖勻，而后進(jìn)行離心處理，所得沉淀物即為小孢子；

（6）、將游離小孢子轉(zhuǎn)移入1/2NLN培養(yǎng)基中，調(diào)整濃度為1～2×10⁵個(gè)/ml,每個(gè)處理10皿，而后轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱進(jìn)行33℃的熱激處理48h，而后轉(zhuǎn)入25℃暗環(huán)境下培養(yǎng)直至胚性愈傷組織形成。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：步驟S1中，砧木的生長(zhǎng)溫度為0℃以上，10℃以下；使得砧木通過春化。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：步驟S2中定植時(shí)，行距為1m，株距為1m，未長(zhǎng)成的小蘿卜完全埋入土中。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：步驟S3中，生長(zhǎng)環(huán)境溫度為15-20℃；矮壯素稀釋液的濃度為500毫克/升，矮壯素稀釋液的灌根用量為：每株100-200毫升。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：步驟S5中，嫁接工序按如下步驟進(jìn)行：

1）、嫁接前對(duì)砧木和刀片分別進(jìn)行消毒，留砧木頂芽和兩個(gè)側(cè)枝，多余側(cè)枝從1cm處切斷；

2）、選取砧木6-10cm的側(cè)枝做嫁接切口，切除側(cè)枝，不能切到中央髓腔部分；

3）、接穗切口與砧木切口相同；

4）、嫁接前確保砧木和接穗切口的濕潤(rùn)，有滲出液；將接穗切口與砧木切口對(duì)齊后立即用保鮮膜扎緊；

5）、捆扎好切口后，將接穗上的頂芽去掉，留1片葉，接穗的側(cè)芽應(yīng)摘心，留1片小葉。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：步驟2）中，側(cè)枝上下各產(chǎn)生1.5-2.5cm長(zhǎng)的切口，切口最寬處為0.6-1cm，最厚處為0.2-0.4mm。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種提高蘿卜種質(zhì)創(chuàng)制效率的方法，其特征在于：嫁接后管理按如下步驟進(jìn)行：

a、嫁接完成后對(duì)嫁接植株及時(shí)澆水，用遮陽(yáng)網(wǎng)進(jìn)行遮陽(yáng)，控制嫁接植株的生長(zhǎng)環(huán)境溫度在18-25℃，使得傷口愈合；

b、待傷口愈合，接穗回復(fù)長(zhǎng)勢(shì)后，摘除砧木的頂芽和多余側(cè)枝，頂芽距離接穗留10-15cm的主枝；

c、嫁接25天左右，去除傷口處的保鮮膜，對(duì)接穗和砧木進(jìn)行捆綁；

d、控制嫁接植株的生長(zhǎng)環(huán)境溫度在10-20℃，待接穗的主枝長(zhǎng)出一級(jí)分支后，將一級(jí)側(cè)枝固定于支架上，接穗主枝去頂，二級(jí)分支開花5-10朵時(shí)，收集2.5-4.5mm花蕾進(jìn)行游離小孢子培養(yǎng)。