[發明專利]一種出芽短梗霉利用無氮培養基生產黑色素的方法

在審

• 申請號: 202111362667.2
• 申請日: 2021-11-17
• 公開（公告）號: CN114134047A
• 公開（公告）日: 2022-03-04
• 發明（設計）人: 曾偉;馬蘭;周然;梁智群;陳桂光
• 申請（專利權）人: 廣西大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P1/02;C12R1/645
• 代理公司: 南寧市來來專利代理事務所(普通合伙) 45118
• 代理人: 來光業

本發明公開了一種出芽短梗霉（Aureobasidium pullulans）GXZ?6，保藏編號為CCTCC NO：M 2017517，發酵生產黑色素的方法，屬于微生物發酵技術領域。該方法以出芽短梗霉為生產菌種，以葡萄糖為底物，輔以KCl和MgSO₄·7H₂O組成無氮培養基，在30℃條件下，采用分批發酵方式生產黑色素，生產得到的黑色素產量可達到4.6g/L。利用這種無氮培養基發酵生產黑色素，具有培養基簡單、原料成本低、生產過程中不易產生泡沫、操作簡便的顯著優勢，極具工業生產潛力。

技術領域

本發明屬于微生物發酵技術領域，具體涉及一種出芽短梗霉利用無氮培養基生產黑色素的方法。

背景技術

黑色素包括天然黑色素和人工合成黑色素兩類，其中天然黑色素是由酪氨酸、多酚及相關化合物代謝產生的，或者由花色素與糖以糖苷鍵結合而成的一類異源多聚芳香族化合物，廣泛存在與動植物及微生物中，為生物體提供結構性強度或保護生物免受紫外線、電離輻射、重金屬污染、低溫或高溫等環境脅迫的傷害，具有重要的生理作用。除此之外，黑色素在農業、輕工業、食品、醫藥等領域具有廣泛應用。例如，在農業領域，可以作為某些對紫外線敏感的生物殺蟲劑的光保護劑；在輕工業領域，可以作為化妝品添加劑用于抗紫外輻射、清除自由基、抗氧化等，作為特種塑料和特種玻璃的著色劑用于防輻射；在食品領域，可以作為酒類、飲料類、嬰兒保健品及大眾食品的天然色素添加劑；在醫藥領域，可以用于抗毒解毒、提高抗輻射能力、提高免疫力等。

由于黑色素具有廣泛的應用前景和價值，而利用微生物生產黑色素相較于化學合成和動植物提取法，具有生產條件溫和、工藝簡單、成本低等優點，目前，已有多種細菌、酵母菌、以及絲狀真菌被報道可用于生產黑色素。其中，出芽短梗霉（Aureobasidium pullulan）是一種極具應用開發價值的黑色素生產菌種。出芽短梗霉是一種具有酵母型和菌絲型的多形態真菌，在世界各地廣泛分布。通常大多數出芽短梗霉會產生黑色素，從而俗稱黑酵母真菌。因此，國內外研究人員針對出芽短梗霉生產黑色素的研究日益增多。

在利用出芽短梗霉生產黑色素的研究方面，檢索到相關的文獻如下：

1、申請號為201110425459.2的中國專利文獻，公開了一種出芽短梗霉聯產普魯蘭多糖和黑色素的方法，利用出芽短梗霉（A. pullulan）作為生產菌株；發酵培養基組成為：蔗糖 180 g/L，蛋白胨 5 g/L，K₂HPO₄ 5 g/L，NaCl 5 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.5 g/L，FeSO₄0.01 g/L；在30 L發酵罐中采用階段控溫策略（前24 h發酵溫度為32℃，后將發酵溫度調整為27℃），發酵4天后從發酵液中獲得3.4 g/L的黑色素粗品。

2、申請號為201110429965.9的中國專利文獻，公開了一種生產黑色素的誘變菌株出芽短梗霉及其培養方法和應用，所用菌株為出芽短梗霉（A. pullulan）；發酵培養基組成為：蔗糖30 g/L，丁二酸銨3 g/L，丁二酸50 g/L，K₂CO₃ 0.4 g/L，K₂HPO₄ 0.1 g/L，MgSO₄·7H₂O 0.1 g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.005 g/L，玉米浸出液0.5 g/L；利用三角瓶發酵6天，黑色素產量為8 g/L。