[發明專利]區別壯藥材假東風草或東風草的方法

有效

• 申請號: 202111359653.5
• 申請日: 2021-11-17
• 公開（公告）號: CN114371228B
• 公開（公告）日: 2023-05-23
• 發明（設計）人: 黃艷菲;蘇宏娜;李學學;劉圓
• 申請（專利權）人: 西南民族大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 成都科奧專利事務所(普通合伙) 51101
• 代理人: 蘇亞超

本發明提供了區別壯藥材假東風草或東風草的方法。本發明發現兩種藥材中的如下兩種成分的比值大小，是鑒定兩種藥材的突破口：即異綠原酸A：隱綠原酸含量或峰面積的比值。

技術領域

本發明主要涉及植物藥鑒定領域，具體涉及壯藥材假東風草或東風草的鑒定。

背景技術

假東風草(Blumea?riparia(Bl.)DC.)是菊科艾納香屬植物，主要分布于我國云南省和廣西省等地以及東南亞大部分國家。假東風草作為壯藥材滇桂艾納香(BlumeaRiparia?Herba)?的來源，收載于《廣西中藥材標準》(第二冊，1996年版)、《湖南省中藥材標準》(2009年版)，用于治療月經不調、產后出血、不孕、經期不定等。

然而，由于野生資源短缺，另一種植物形態相似的菊科艾納香屬植物東風草(B.megacephala(Randeria)Chang?et?Tseng)被用作滇桂艾納香的替代藥材使用，存在巨大用藥安全隱患。假東風草和東風草原植物形狀相似，難以鑒別區分，頭狀花序的大小是區分的主要形態特征。

通過形態學鑒定、顯微鑒定、薄層色譜(TLC)鑒定和色譜指紋圖譜的研究，林雀躍等發現假東風草和東風草具有高度的相似性。發明人課題組在前期報道過利用SCoT分子標記可以成功鑒定假東風草和東風草，表明它們在分子水平上存在顯著差異(基于SCoT標記對壯藥材滇桂艾納香常混淆基原植物假東風草和東風草的鑒別研究,中草藥2021年8月第52卷第?15期)。然而，假東風草與東風草差異的化學成分基礎尚不清楚，課題組前期試圖通過液相色譜法對其進行鑒別，采用2020年版《中國藥典》方法測定水分、灰分、浸出物，紫外-可見光光度法測定總黃酮含量，HPLC法測定3，4-二咖啡酰奎寧酸和3，5-二咖啡酰奎寧酸的含量，聚類分析和主成分分析進行數據處理(基于多元統計分析和多指標評價假東風草和東風草的質量,中成藥2021年4月第43卷第4期)，但是，不能將假東風草和東風草明顯區分開。

因此，如何區分這兩種相似的藥材基礎化學成分是一個挑戰。

發明內容

為了解決上述問題，發明人對兩種藥材進行了化學成分的檢測鑒定，共從假東風草和東風草中鑒定出93種化學成分，然而，兩種藥材的化學成分種類并無明顯區別特征，單純從化學成分的有無方面無法將兩種藥材區分鑒定。

令人意外的是，發明人偶然發現了兩種藥材中的如下兩種成分的比值大小，是鑒定兩種藥材的突破口：即異綠原酸A：隱綠原酸含量或峰面積的比值。

發明人研究發現，在區別壯藥材假東風草、東風草時，測定待檢藥材中異綠原酸A：隱綠原酸的含量比值；比值大于18：1，待檢藥材為東風草；比值小于18：1待檢藥材為假東風草。

上述方法，可以采用任意可測定異綠原酸A、隱綠原酸含量的方法均可。

例如，測定方法可以選自HPLC、UPLC、LC-MS之一。

若選用HPLC，所述HPLC條件可以選擇現有技術中對于假東風草或/和東風草檢測的液相色譜條件。

例如：

固定相：C18色譜柱

流動相為乙腈(A)-0.05～0.5％酸水溶液(B)，梯度洗脫程序為：0～10min,10％～15％B；?10～40min,15％～25％B；40～55min,25％～35％B；55～70min,35％～55％B；70～75min,?55％-70％B；75～85min,70％-100％B；85～90min,100％-100％B。

其中，所述酸可以適用但不限于甲酸、乙酸或磷酸。

酸水溶液的濃度可以根據分離效果進行適當調整，例如可以選擇0.05％、0.1％、0.15％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％等不同濃度。

若選用LC-MS，其條件如下：