[發(fā)明專利]一種基于肽和抗體的疾病蛋白標(biāo)志物的檢測試劑盒及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111346805.8
• 申請日: 2021-11-15
• 公開（公告）號: CN114019172B
• 公開（公告）日: 2022-08-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李燦鵬;趙卉;鄭凈
• 申請（專利權(quán)）人: 云南大學(xué)
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/531;G01N33/543
• 代理公司: 北京高沃律師事務(wù)所 11569
• 代理人: 薛紅凡

1.一種基于肽和抗體的疾病蛋白標(biāo)志物的檢測試劑盒，其特征在于，包括以下組分：

包被于固相載體的蛋白標(biāo)志物抗體、肽的生物探針材料Pep/PtPd@ZrN@COF；

所述肽的生物探針材料Pep/PtPd@ZrN@COF的制備方法，包括以下步驟：

1)將ZrCl₄和尿素絡(luò)合，得到溶膠在惰性氣體下600～1000℃下煅燒鈍化，得到ZrN NPs；

2)將三(四苯甲醛基)磷、對苯二胺、步驟1)中所述ZrN NPs、1，4-二惡烷和均三甲苯混合，在乙酸作用下，經(jīng)完全脫氣，在100～180℃下反應(yīng)，得到ZrN@COF；

3)在水合肼催化作用下，將PdCl₂、Na₂PtCl₄、PVP進(jìn)行反應(yīng)，獲得的鉑鈀納米花溶液PtPdANFs和步驟2)中所述ZrN@COF混合，得到PtPd@ZrN@COF；

4)將步驟3)中所述PtPd@ZrN@COF的分散液結(jié)合蛋白標(biāo)志物特異性肽，得到Pep/PtPd@ZrN@COF。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，基于ELISA檢測原理，所述包被于固相載體的蛋白標(biāo)志物抗體中固相載體為微孔板。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述檢測試劑盒，其特征在于，基于電化學(xué)生物傳感器檢測原理，所述包被于固相載體的蛋白標(biāo)志物抗體中固相載體為金納米粒子負(fù)載的聚苯胺包覆的氧化鈰Au@PDA@BCN復(fù)合物電極。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述檢測試劑盒，其特征在于，所述金納米粒子負(fù)載的聚苯胺包覆的氧化鈰Au@PDA@BCN復(fù)合物電極的制備方法，包括以下步驟：

1)將Ce(NO₃) ₂·6H₂O和NH₃·H₂O反應(yīng)，得到CeO₂；

2)在引發(fā)劑的作用下將步驟1)中所述CeO₂和苯胺單體混合反應(yīng)，得到聚苯胺包覆的氧化鈰材料PANI@CeO₂；

3)將步驟2)中聚苯胺包覆的氧化鈰材料PANI@CeO₂和金納米粒子混合反應(yīng)，得到金納米粒子負(fù)載的聚苯胺包覆的氧化鈰Au@PDA@BCN復(fù)合物；

4)將步驟3)所述金納米粒子負(fù)載的聚苯胺包覆的氧化鈰Au@PDA@BCN復(fù)合物分散在拋光的碳電極上，封閉，得到Au@PDA@BCN復(fù)合物電極。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟1)中Ce(NO₃ )₂·6H₂O的質(zhì)量和NH₃·H₂O的體積比為100～600mg：1.5～10.5ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟2)中CeO₂和苯胺單體的質(zhì)量體積比為100～1000mg：1～8ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述檢測試劑盒，其特征在于，步驟3)中PANI@CeO₂和金納米粒子的質(zhì)量體積比為0.5～10mg：2～10ml。

8.根據(jù)權(quán)利要求3～7任意一項所述檢測試劑盒，其特征在于，所述肽的生物探針材料Pep/PtPd@ZrN@COF為結(jié)合有甲苯胺藍(lán)的Pep/PtPd@ZrN@COF。

9.權(quán)利要求1～8任意一項所述檢測試劑盒在非疾病診斷目的的檢測疾病生物標(biāo)志物中的應(yīng)用。